使用我们经验证的工作流程生成高质量的 Sanger 测序数据

我们简单且快速的 Sanger 测序工作流程可以在不到一个工作日内完成从提取样本到获得结果。从 PCR 扩增到数据分析,我们推荐的工作流程中的许多步骤都能获得 Applied Biosystems 产品的支持。请由下方来详细了解我们推荐的 Sanger 测序工作流程的每个步骤。

视频:如何进行 Sanger 测序

工作流程

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 用于 PCR 和 Sanger 测序的引物设计工具

使用我们的在线 Invitrogen™ Primer Designer™ 工具,从数据库中搜索正确的 PCR/Sanger 测序引物对。我们的数据库包含约 650,000 个用于人类外显子组和人类线粒体基因组测序的预设计引物对。从不同的扩增子长度中进行选择,以适应不同的研究应用和生物样本类型。

  • 我们的引物不含已知的 SNP 和引物二聚体,具有高度靶点特异性,适用于通用 PCR 条件 
  • 完全的引物覆盖,适用于 Ion Torrent™ AmpliSeq™ Exome Panel 和 Ion Torrent™ AmpliSeq™ Cancer Hotspot Panel v.2 Sanger 验证工作流程
  • 灵活的引物配置,可满足您的研究需求:引物可订购无修饰、M13 加尾、HPLC 纯化或脱盐形式
  • 所有引物都经过质谱检查,并且已通过严格的生物信息学度量;实验台验证测试显示成功率 >95%

浏览工具 ›


Platinum II Taq 热启动 DNA 聚合酶

Invitrogen Platinum II  Taq  热启动 DNA 聚合酶可帮助您更快地进行测序反应。创新缓冲液、高性能  Taq  DNA 聚合酶和 Platinum 热启动技术的独特组合即使在严苛的应用中也能获得出色的 PCR 结果。

 

  • 通用引物在 60°C 退火,可实现所有检测的共循环,减少繁琐的优化步骤
  • 工程化  Taq  聚合酶使 DNA 合成速度提高 4 倍,且具有抑制剂抗性和强大的扩增能力
  • Platinum 热启动技术——可提供出色的特异性、灵敏度及产量;并可实现室温条件反应设置
  • 2X 预混液有助于通过更少的移液步骤减少移液错误

可参考thermofisher.com/platinumiitaq以查看更多格式和信息。

ExoSAP-IT Express 试剂:快速的 PCR 纯化方法

Applied Biosystems ExoSAP-IT Express 试剂可提供快速的实验周期以及更有高效率的资源利用,并能保证同原先 ExoSAP-IT 试剂具有相同品质的纯化效果。无需离心柱、磁珠、沉淀、过滤和凝胶纯化。全新 ExoSAP-IT 技术可实现用较少的步骤在显著缩短的时间里完成样品的纯化,具有简单的工作流程。

  • 5分钟操作步骤
  • 一管式的一步法 PCR 纯化
  • 新型酶技术
  • PCR 产品的完整回收

 

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视频:如何使用 ExoSAP-IT Express 试剂进行 PCR 反应的纯化

我们一直在开发出色的 Sanger 测序试剂盒,为您的所有应用和模板提供解决方案。

BigDye Direct 循环测序试剂盒

Applied Biosystems BigDye Direct 循环测序试剂盒通过将 PCR 后的纯化和循环次数整合至一步,简化了 Sanger 测序的工作流程。BigDye Direct 循环测序试剂盒需要 PCR 引物带有 M13 尾,可通过引物设计工具进行获取。

视频:使用 BigDye Direct 循环测序试剂盒进行测序

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BigDye Terminator v3.1 循环测序试剂盒

BigDye Terminator v3.1 循环测序试剂盒由专家创建并由专业团队改进,具有出色的多功能性和高性能。 这是一个完整的详尽解决方案,专为 PCR 产物、质粒、Fosmid 和 BAC 模板进行从头测序、重测序和拼接而设计。

可在使用具有挑战性的模板时提高结果质量和成功率

  • 适用于多种测序应用
  • 针对长读长应用进行了优化
  • 先进的染料迁移性能
  • 在连读富含 GT 的区域时具有更好的性能
  • 优化的信号平衡
  • 快速完成测序项目

了解更多有关 BigDye Terminator v3.1 循环测序试剂盒的信息 ›

BigDye Terminator v1.1 循环测序试剂盒

Applied Biosystems BigDye Terminator v1.1 循环测序试剂盒对于靠近引物的碱基有出色识别能力,并可用于快速电泳模式下的短 PCR 产物模板测序。

了解更多有关 BigDye Terminator v1.1 循环测序试剂盒的信息 ›

BigDye XTerminator 纯化试剂盒

Applied Biosystems BigDye XTerminator 纯化试剂盒可为 DNA 测序反应去除未插入的 BigDye 终止子和盐离子提供一种快速而简单的纯化方法。再也没有染料团!纯化过程可在40分钟内完成而手工操作时间一般短于10分钟。

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视频:如何使用 BigDye Xterminator 试剂盒纯化测序反应

满足不同通量需求的一系列平台

 

通量

 

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仪器上的耗材对于测序反应至关重要。使用正确的 Applied Biosystems 产品将有助于降低重新测序的几率并确保高质量可重复数据的获取。

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SeqStudio 卡夹

Applied Biosystems SeqStudio 卡夹是一款易于使用的试剂卡夹,包含毛细管、POP-1 通用型胶、缓冲液和真空泵。POP-1 通用型胶使您可在 SeqStudio 基因分析仪系统上使用同一卡夹,灵活地进行 Sanger 测序和片段分析。直接上样,插入卡夹即可运行。

浏览其他仪器上的耗材

视频:如何设置 Sanger 测序或进行片段分析

Minor Variant Finder 软件

通过 Applied Biosystems Minor Variant Finder 软件而实现的灵敏度提升使得 Sanger 法测序成为肿瘤学家和病理学家用于低频(5%或更低)体细胞突变(通常相关目标的数量也有限)检测的理想选择。该软件不需要对您现有的 Singer 测序工作流程做出改变。

优势包括:

  • 检测频率低至5%的低频突变
  • 低成本实现中等数量目标的测序
  • 用于二代测序结果的验证,并可提供比对视图及韦恩图结果

视频:如何使用 Sanger 测序进行低频突变的检测

Sanger Analysis Modules—免费云端工具

Applied Biosystems Sanger Analysis Modules 是免费的创新性云端辅助数据分析工具,可将多个数据集结果简便地汇总在一起。该在线解决方案可更加容易地进行 Sanger 测序数据的查看、储存和分析。

主要优势包括:

  • 二代测序(NGS)结果验证—对 NGS 变异结果进行集中验证
  • 带有绝对基因组坐标信息报告—不再需要根据参考基因组进行计算
  • 自动化数据库查询—对于 SNP 可自动添加基因组注释信息
  • .Vcf 格式文件输出便于下游分析—利用 Ion Reporter 注释流程在多个数据库中进行查询

有关 Sanger 测序以及片段分析软件的更多信息›

Sanger 测序试剂盒

Applied Biosystems Sanger 测序试剂盒为准备测序反应提供了一种方便且实惠的解决方案。该试剂盒提供 PCR 产物纯化、循环测序和测序产物纯化所需的所有试剂。 了解更多信息 ›

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Sanger 测序化学研究指南

供科学家和研究人员使用 Sanger 法测序的完整手册在该化学手册中,您将了解到 Sanger 测序从工作流程到应用的基本原理。

  • Sanger 测序应用
  • DNA 模板制备
  • 循环测序
  • 延伸产物的纯化
  • 毛细管电泳
  • 数据分析
  • 故障排除
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获取日常 Sanger 测序和片段分析问题的简短答案

了解测序的历史,以及如何选择适合您研究需求的平台。

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您对Sanger测序有任何问题吗? Seq It Out系列视频将为您的日常测序问题提供简短的解答。

了解测序的历史,以及如何为您的研究需求选择合适的平台。

仅供科研使用,不可用于诊断目的。