高保真DNA聚合酶

Invitrogen Platinum SuperFi II DNA 聚合酶是一种含热启动的 校正 DNA 聚合酶,可为您的 PCR 扩增提供卓越的保真度和特异性。凭借> 300x Taq 的高保真度和可使用60°C 通用引物退火温度的独特缓冲液,Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可为诸如 分子克隆 测序 定点突变 等需要高度扩增精确性的 PCR 实验应用提供高效性和便利性。

产品优势

  • 卓越的准确度 ——经NGS测序鉴定,其保真度高出 Taq 保真度 300 倍以上
  • 简化的实验流程——缓冲液经优化可使用60°C的通用引物退火温度(无需计算 Tm
  • 增强的 PCR 成功率——高效扩增高 GC 含量靶标、纯度不佳的 DNA 和长片段序列
  • 兼容自动化——Invitrogen Platinum 热启动技术可确保反应体系配制后24小时的室温稳定性
  • 减少移液步骤——可提供含或不含上样染液的预混液

客户对 Platinum SuperFi II 酶的评价

在病毒研究中,Platinum SuperFi II DNA 聚合酶具有极高的保真度和稳健性:

病毒
  • 克隆病毒成分,进行分子和结构研究
  • 操纵或变异病毒和宿主基因,寻找潜在的药物靶点
  • 为疫苗研究创建重组病毒和宿主蛋白质

了解在 SARS-CoV-2 研究中如何使用这种酶 请参阅 Xie X, Muruato A, Lokugamage KG, et al. (2020) An Infectious cDNA Clone of SARS-CoV-2. Cell Host Microbe S1931-3128(20)30231-6.

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的优势

>300x Taq高保真度

Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶错配率极低,可确保DNA 序列的高度准确性。经 NGS 检测,Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的相对 保真度 超过 Taq DNA 聚合酶的 300 倍。

市售 Taq 酶的条形图标明,Platinum SuperFi II 酶比 Taq 酶的保真度高出 350 倍 。
图 1. 市面上商业供应PCR酶相对于 Taq 酶的保真度比较。 使用不同的 DNA 聚合酶通过 PCR 扩增 3.9kb 的序列,然后用 MuA 转座酶将得到的 PCR 扩增子片段化。在片段化过程中引入了由 12 个随机核苷酸组成的独特分子标签(UMI),以单独标记每个产物。经NGS测序后,将reads与正确序列比对,按照UMI 分组,以此发现扩增中的错误。只有当错误出现在同一UMI标记的所有reads中时,错误才得以识别确认;否则将作为测序错误而被丢弃。以 Taq DNA 聚合酶作为标准来衡量聚合酶的保真度。

视频:什么是高保真 PCR?

了解高保真PCR及其应用。了解如何使用高保真 PCR 酶减少扩增错误。

60°C 通用引物退火

Platinum SuperFi II 缓冲液的独特配方有助于减少 PCR 中繁琐的优化步骤。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶时,不再需要计算退火步骤的引物解链温度。按照一般的引物设计规则图 2)得到的引物,无论引物序列如何,该创新的缓冲液均能够实现使用60°C的统一引物退火温度。当然如果在退火步骤中使用自己计算的 Tm 时,该缓冲液同样能确保成功进行扩增(数据未显示)。

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶在 60°C 的通用退火温度下可获得具有高特异性和高产率的 PCR 产物。

图2.Platinum SuperFi II DNA 聚合酶在 60°C 的通用退火温度下可获得具有高特异性和高产率的 PCR 产物。使用不同退火温度的引物对在 60°C 退火温度下从 50ng 人基因组 DNA中扩增 12 个靶标。所使用的分子量标准为是 Invitrogen TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。以上用于 Platinum SuperFi DNA 聚合酶的退火温度是经使用 Tm 计算器计算得到的。

了解退火步骤在 PCR 中的重要性、如何使用特殊 PCR 缓冲液避免反应优化,以及缓冲液使用通用退火温度的优势。

通用扩增方案

由于使用创新型的反应缓冲液,Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶可使用通用的退火温度和灵活的延长时间,实现多个PCR反应的同时扩增。

图解说明了在 1 至 2 小时内用一种通用方案同时扩增 3 种不同 PCR 靶标的重复实验。
图 3.借助通用 PCR 扩增方案节约时间和实现不同PCR反应的同时扩增。 使用一般的PCR 试剂,扩增每个 DNA 片段都需要特定的扩增方案,这是由于需要不同的引物退火温度和延伸步骤;因此,在同一次 PCR 运行中通常不能将多个靶标一起进行扩增。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶,可以使用一种通用扩增方案将不同的 PCR反应同时进行扩增,该扩增方案使用60°C通用引物退火温度和按最长片段计算的延伸时间( 图 4 )。
使用相同的方案用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶扩增不同大小的 PCR 片段的凝胶分析

图 4.Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可以实现短片段和长片段的同时扩增。从 100 ng 人类基因组 DNA 中扩增 0.7 kb、2.0 kb、4.8 kb 和 14 kb 片段,均使用相同的扩增方案:98℃ 变性 10 秒,60℃ 退火 10 秒,72℃ 延伸 7 分钟。 延伸时间基于最长片段进行计算。

直接凝胶上样电泳

Platinum SuperFi II Green PCR 预混液 可实现 PCR 产物直接上样电泳,省去了 PCR 样品中加染料的环节,且有助于减少移液错误。绿色缓冲液与下游实验应用相兼容,包括 DNA 测序连接和限制性酶切

图解步骤说明用 Platinum SuperFi II Green PCR预混液扩增 PCR 产物并将绿色反应混合物分离成蓝色和黄色标记物。

图 5.绿色预混液可实现 PCR 产物直接加样至凝胶中进行分析。Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的预混液可提供含绿色缓冲液的形式,其中包含一种密度试剂和两种示踪染料。借助两种染料(蓝色和黄色),可以在电泳过程中轻松地观察 DNA 条带的迁移(如右图电泳5 分钟和 15 分钟的泳道)。

>300x Taq高保真度

Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶错配率极低,可确保DNA 序列的高度准确性。经 NGS 检测,Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的相对 保真度 超过 Taq DNA 聚合酶的 300 倍。

市售 Taq 酶的条形图标明,Platinum SuperFi II 酶比 Taq 酶的保真度高出 350 倍 。
图 1. 市面上商业供应PCR酶相对于 Taq 酶的保真度比较。 使用不同的 DNA 聚合酶通过 PCR 扩增 3.9kb 的序列,然后用 MuA 转座酶将得到的 PCR 扩增子片段化。在片段化过程中引入了由 12 个随机核苷酸组成的独特分子标签(UMI),以单独标记每个产物。经NGS测序后,将reads与正确序列比对,按照UMI 分组,以此发现扩增中的错误。只有当错误出现在同一UMI标记的所有reads中时,错误才得以识别确认;否则将作为测序错误而被丢弃。以 Taq DNA 聚合酶作为标准来衡量聚合酶的保真度。

视频:什么是高保真 PCR?

了解高保真PCR及其应用。了解如何使用高保真 PCR 酶减少扩增错误。

60°C 通用引物退火

Platinum SuperFi II 缓冲液的独特配方有助于减少 PCR 中繁琐的优化步骤。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶时,不再需要计算退火步骤的引物解链温度。按照一般的引物设计规则图 2)得到的引物,无论引物序列如何,该创新的缓冲液均能够实现使用60°C的统一引物退火温度。当然如果在退火步骤中使用自己计算的 Tm 时,该缓冲液同样能确保成功进行扩增(数据未显示)。

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶在 60°C 的通用退火温度下可获得具有高特异性和高产率的 PCR 产物。

图2.Platinum SuperFi II DNA 聚合酶在 60°C 的通用退火温度下可获得具有高特异性和高产率的 PCR 产物。使用不同退火温度的引物对在 60°C 退火温度下从 50ng 人基因组 DNA中扩增 12 个靶标。所使用的分子量标准为是 Invitrogen TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder。以上用于 Platinum SuperFi DNA 聚合酶的退火温度是经使用 Tm 计算器计算得到的。

了解退火步骤在 PCR 中的重要性、如何使用特殊 PCR 缓冲液避免反应优化,以及缓冲液使用通用退火温度的优势。

通用扩增方案

由于使用创新型的反应缓冲液,Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶可使用通用的退火温度和灵活的延长时间,实现多个PCR反应的同时扩增。

图解说明了在 1 至 2 小时内用一种通用方案同时扩增 3 种不同 PCR 靶标的重复实验。
图 3.借助通用 PCR 扩增方案节约时间和实现不同PCR反应的同时扩增。 使用一般的PCR 试剂,扩增每个 DNA 片段都需要特定的扩增方案,这是由于需要不同的引物退火温度和延伸步骤;因此,在同一次 PCR 运行中通常不能将多个靶标一起进行扩增。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶,可以使用一种通用扩增方案将不同的 PCR反应同时进行扩增,该扩增方案使用60°C通用引物退火温度和按最长片段计算的延伸时间( 图 4 )。
使用相同的方案用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶扩增不同大小的 PCR 片段的凝胶分析

图 4.Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可以实现短片段和长片段的同时扩增。从 100 ng 人类基因组 DNA 中扩增 0.7 kb、2.0 kb、4.8 kb 和 14 kb 片段,均使用相同的扩增方案:98℃ 变性 10 秒,60℃ 退火 10 秒,72℃ 延伸 7 分钟。 延伸时间基于最长片段进行计算。

直接凝胶上样电泳

Platinum SuperFi II Green PCR 预混液 可实现 PCR 产物直接上样电泳,省去了 PCR 样品中加染料的环节,且有助于减少移液错误。绿色缓冲液与下游实验应用相兼容,包括 DNA 测序连接和限制性酶切

图解步骤说明用 Platinum SuperFi II Green PCR预混液扩增 PCR 产物并将绿色反应混合物分离成蓝色和黄色标记物。

图 5.绿色预混液可实现 PCR 产物直接加样至凝胶中进行分析。Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的预混液可提供含绿色缓冲液的形式,其中包含一种密度试剂和两种示踪染料。借助两种染料(蓝色和黄色),可以在电泳过程中轻松地观察 DNA 条带的迁移(如右图电泳5 分钟和 15 分钟的泳道)。

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的强劲扩增能力

由于酶的强劲扩增能力和出色的热启动技术,Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可高产量地、高特异性地扩增多种不同长度的片段。基于抗体的 Platinum 热启动技术在最初的 PCR 变性步骤之前抑制酶的活性,防止非特异性扩增和引物降解,同时可确保目的片段的高产量扩增。

比较 Platinum SuperFi II 酶与 3 种市售 DNA 聚合酶的凝胶分析

图 6.适用于扩增多种不同长度的片段Platinum SuperFi II DNA 聚合酶(左侧泳道)可高产量和高特异性地从 100 ng 人类基因组 DNA 扩增 0.3 kb 至 14 kb 的DNA 片段。同时使用其他 DNA 聚合酶扩增相同的靶标。所使用的分子量标准为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的高灵敏度可以实现低丰度 DNA 模板的检测,并获得准确的扩增结果。在起始材料有限或样品中目标 DNA 浓度较低的实验中,DNA聚合酶的高灵敏度是非常有利的。

用 Platinum SuperFi II DNA聚合酶从0.4-250ng 人基因组 DNA 中扩增 2kb 片段的 PCR 凝胶。

图 7.从少量起始 DNA 中实现高灵敏度和可靠的扩增。Platinum SuperFi II DNA 聚合酶(左侧泳道)可分别从 0.4 ng、2 ng、10 ng、50 ng 和 250 ng 人基因组 DNA中稳定扩增一个 2 kb 的片段(模板量显示在每个泳道上方)。同时使用其它DNA 聚合酶扩增相同的靶标。预估的拷贝数约为每 0.4ng 人类基因组 DNA 中100 个拷贝。所使用的分子量标准为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶经设计含有 DNA 结合结构域,从而实现高持续合成能力,并增强对常见 PCR 抑制剂的耐受性,如氯化血红素(红细胞成分)、木聚糖(植物生物聚合物)和腐殖酸(土壤)。

从添加了腐殖酸、血红素和胆汁盐的 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增 2 kb 片段的 PCR 凝胶

图 8.Platinum SuperFi II DNA 聚合酶显示出对常见 PCR 抑制剂的高度耐受性。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶和其他高保真 DNA 聚合酶从 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增出 2 kb 人类基因组 DNA 片段。反应混合物中包含 1—无抑制剂,2—腐植酸(4 µg/mL),3—血红素(20 µM),或者 4—胆盐(1 mg/mL)。所使用的分子量标准为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的室温稳定性得到增强,可实现高通量PCR扩增。其卓越的 Platinum 热启动技术可实现室温稳定性和酶的高特异性。

PCR 凝胶显示在体系配置室温 24 小时后从 50ng 人基因组 DNA 扩增的 0.5kb 片段

图 9.使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶配制的反应体系可在室温下保持稳定。从 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增出一个 0.5 kb 的片段。配制 PCR 反应体系,并在室温下放置 0 小时和 24 小时,然后再通过Applied Biosystems ProFlex 热循环仪进行扩增。可以看到,即使在室温下放置 24 小时后,Platinum SuperFi II DNA 聚合酶(泳道 P)也能获得高特异性和高产量的扩增结果。同时使用其它 DNA 聚合酶进行同样的实验。所使用的分子量标准是 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶对不同类型模板进行 PCR扩增

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶由于其酶的强扩增能力和使用特殊的缓冲液,可以高特异性地扩增各种序列。Platinum SuperFi II 缓冲液可扩增高 GC 含量的靶标,而无需添加 DNA 解链添加剂。

从 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增出富含 AT 和 GC 的靶标的 PCR 凝胶

图 10.使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶强劲扩增富含 AT 和 GC 的靶标。从 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增出 15 个具有不同 GC 含量的靶标,而未添加任何有助于 DNA 变性的添加剂。所使用的分子量标准为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

从 50 ng 人类基因组 DNA 中扩增出富含 GC 的靶标(73% 至 77%)的 PCR 凝胶

图 11.强劲扩增富含 GC 的靶标。Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可对高GC含量靶标进行高特异性和高产量的扩增(左侧泳道),而未添加任何 DNA 解链添加剂。从 50 ng 人基因组 DNA 中扩增出四个富含 GC 的片段(长度分别为 0.74 kb、0.58 kb、0.71 kb 和 0.72 kb;GC 含量如上标注)。根据制造商推荐的用于高 GC 含量模板的 PCR 扩增方案,使用同类DNA 聚合酶同时扩增相同的靶标。所使用的分子量标记为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

由于其 高持续合成能力 和极低的错配率,Platinum SuperFi II DNA 高保真聚合酶是准确扩增长片段(长达 20 kb)的理想选择,其还可扩增更长的靶标(长达 40 kb),但可能需要进行一些优化,例如使用高质量的模板(纯净、新鲜和完整的模板)和新鲜的引物溶液。将引物浓度降低至 0.2 μM 也可以改善PCR扩增结果。

从 200 ng 人类基因组 DNA 中扩增出两个 20 kb 靶标的 PCR 凝胶

图 12.长片段扩增。使用Platinum SuperFi II DNA 聚合酶(泳道 P)成功地从 200 ng 人类基因组 DNA 中扩增出 20 kb 的靶标。使用相同的引物对,同类DNA 聚合酶也进行了测试。所使用的分子量标记为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

从 50 ng 大肠杆菌基因组 DNA 中扩增出长片段(30 kb 和 40 kb)的 PCR 凝胶

图 13.扩增 >20 kb片段。使用Platinum SuperFi II DNA 聚合酶(泳道P)从 50 ng 的大肠杆菌基因组 DNA 中成功扩增出 30 kb 的靶标和 40 kb 的靶标。使用相同的引物对,同类DNA 聚合酶也进行了测试。所使用的分子量标记为 TrackIt 1 Kb Plus DNA Ladder

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶由于具有很高的特异性高持续合成能力,可以在所提供的缓冲液中对不同浓度模板进行多重PCR扩增,而无需进行费力的反应优化。

在同一反应中 从 2.5 ng、25 ng 和 250 ng 人类基因组 DNA 中扩增了 199 bp 至 1.6 kbp 的 15 个片段的 PCR 凝胶

图 14.使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶对不同浓度模板进行多重 PCR扩增。从 2.5 ng、25 ng 和 250 ng 人类基因组 DNA 中(模板量显示在每个泳道上方)同时扩增15 个靶标(99 bp;131 bp;160 bp;199 bp;251 bp;300 bp;345 bp;400 bp;516 bp;613 bp;735 bp;908 bp;1,005 bp;1,190 bp;和 1,606 bp)。所使用的分子量标记为 TrackIt 100 bp DNA Ladder

由于具有高特异性和高抑制剂耐受性,Platinum SuperFi II DNA 聚合酶能够高效扩增质量不佳的 DNA 模板,如福尔马林固定的石蜡包埋(FFPE)样本。

从 FFPE 块中提取的 10 g 小鼠 DNA 中扩增出 0.2 kb、0.3 kb 和 0.4 kb 片段的 PCR 凝胶

图 15.对FFPE 样本 DNA 的扩增。对于使用Invitrogen RecoverAll FFPE 总核酸分离试剂盒提取的 10 ng 小鼠 FFPE DNA, Platinum SuperFi II DNA聚合酶可从中成功扩增长达 0.4 kb 的片段。所使用分子量标记为 TrackIt 100 bp DNA Ladder

视频:校对 PCR 酶,具有超高保真度、长片段扩增和易用性

观看 Invitrogen Platinum SuperFi II DNA 聚合酶为您的 PCR 带来的好处,包括超高保真度、长片段扩增和通用退火方案。

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶和 Platinum SuperFi DNA 聚合酶之间的差异

Platinum SuperFi II DNA 聚合酶的缓冲液中含有共稳定组分。这种独特的缓冲液成分带来了多种优势:不需要计算引物的Tm,对富含 GC 靶标的扩增能力更强,可扩增更长的片段,以及可使用 通用 PCR 扩增方案 更适合高通量 PCR扩增( 表 1 )。

表 1.Platinum SuperFi II 和 Platinum SuperFi DNA 聚合酶之间的比较。

 Platinum SuperFi II
DNA 聚合酶
Platinum SuperFi
DNA 聚合酶
保真度(vs. Taq超出 300 倍超出 300 倍
热启动修饰
需要Tm 计算器否(60°C 下引物退火)
通用 PCR 扩增方案
高 GC 含量模板扩增是(无需 GC enhancer)是(推荐 GC enhancer)
长片段扩增长达 20 kb(性能得到增强)长达 20 kb
室温稳定性长达 24 小时长达 24 小时
抑制剂耐受性
扩增子的 3’ 端 平末端平末端
残留 DNA(每 50 μL rxn)≤1 个细菌 DNA拷贝≤ 0.3 个人类 DNA 拷贝 ≤1 个细菌 DNA 拷贝
≤ 0.2 个人类 DNA 拷贝 

References

病毒研究

使用方法参考文献  
扩增用于 Illumina 测序的 SARS-CoV-2 全基因组 Botelho-Souza LF, Nogueira-Lima, FS, Roca TP et al. (2021) SARS-CoV-2 genomic surveillance in Rondônia, Brazilian Western Amazon. Sci Rep 11: 3770. 
目标捕获和富集SARS-CoV-2 cDNA 池,用于 Illumina 测序Choudhury Y, Cher CY, Wan ZY et al. (2021) A viral fragmentation signature for SARS-CoV-2 in clinical samples correlating with contagiousness. medRxiv doi: https://doi.org/10.1101/2021.01.11.21249265 
SARS-CoV-2 全基因组克隆,用于功能研究 Kotaki T, Xie X, Shi PY et al. (2021) A PCR amplicon-based SARS-CoV-2 replicon for antiviral evaluation. Sci Rep 11: 2229. 
对人体血清样本中的病毒基因进行 RT-PCR,然后进行 Sanger 测序 Lan Y, He X, Xin R (2021) Genetic characteristics of HIV-1 CRF12_BF first identified in Guangdong province, China. AIDS Res Hum Retroviruses 37(2):157–161. 
扩增 HIV-1 基因 Lugongolo MY, Manoto SL, Maphanga C et al. (2021) Label-free detection of mutations in the HIV genome using a surface plasmon resonance biosensor. SPIE BiOS https://doi.org/10.1117/12.2578317
扩增 SARS-CoV-2 全基因组,进行 Illumina 测序Nascimento VAD, Corado ALG, Nascimento FOD et al. (2020) Genomic and phylogenetic characterisation of an imported case of SARS-CoV-2 in Amazonas State, Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz 115:e200310.
克隆SARS-CoV1 和 SARS-CoV-2 穗状变体,用于结合试验Stamatatos L, Czartoski J, Wan YH et al. (2021) Antibodies elicited by SARS-CoV-2 infection and boosted by vaccination neutralize an emerging variant and SARS-CoV-1. medRxiv doi: https://doi.org/10.1101/2021.02.05.21251182
克隆大型病毒基因片段,用于全基因组组装 Xie X, Lokugamage KG, Zhang X et al. (2021) Engineering SARS-CoV-2 using a reverse genetic system. Nat Protoc 16(3):1761–1784.
克隆SARS-CoV-2 全基因组,用于功能研究Xie X, Muruato A, Lokugamage KG, et al. (2020) An Infectious cDNA Clone of SARS-CoV-2. Cell Host Microbe 27(5):841–848.

其他微生物

使用方法参考文献 
检测金黄色葡萄球菌基因的多重 PCR Allam A, Fakhr A, Mahmoud M et al. (2021) Staphylococcus aureus nasal colonization among health care workers at an Egyptian tertiary care hospital. Microbes and Infectious Diseases 2(1):108–118. 
对真菌样本的 gDNA 和 cDNA 进行 PCR,然后进行 Sanger 测序

 

Ferrara M, Gallo A, Perrone G et al. (2020) Comparative genomic analysis of ochratoxin A biosynthetic cluster in producing fungi: new evidence of a cyclase gene involvement. Front Microbiol 11:581309. 

病毒研究

使用方法参考文献  
扩增用于 Illumina 测序的 SARS-CoV-2 全基因组 Botelho-Souza LF, Nogueira-Lima, FS, Roca TP et al. (2021) SARS-CoV-2 genomic surveillance in Rondônia, Brazilian Western Amazon. Sci Rep 11: 3770. 
目标捕获和富集SARS-CoV-2 cDNA 池,用于 Illumina 测序Choudhury Y, Cher CY, Wan ZY et al. (2021) A viral fragmentation signature for SARS-CoV-2 in clinical samples correlating with contagiousness. medRxiv doi: https://doi.org/10.1101/2021.01.11.21249265 
SARS-CoV-2 全基因组克隆,用于功能研究 Kotaki T, Xie X, Shi PY et al. (2021) A PCR amplicon-based SARS-CoV-2 replicon for antiviral evaluation. Sci Rep 11: 2229. 
对人体血清样本中的病毒基因进行 RT-PCR,然后进行 Sanger 测序 Lan Y, He X, Xin R (2021) Genetic characteristics of HIV-1 CRF12_BF first identified in Guangdong province, China. AIDS Res Hum Retroviruses 37(2):157–161. 
扩增 HIV-1 基因 Lugongolo MY, Manoto SL, Maphanga C et al. (2021) Label-free detection of mutations in the HIV genome using a surface plasmon resonance biosensor. SPIE BiOS https://doi.org/10.1117/12.2578317
扩增 SARS-CoV-2 全基因组,进行 Illumina 测序Nascimento VAD, Corado ALG, Nascimento FOD et al. (2020) Genomic and phylogenetic characterisation of an imported case of SARS-CoV-2 in Amazonas State, Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz 115:e200310.
克隆SARS-CoV1 和 SARS-CoV-2 穗状变体,用于结合试验Stamatatos L, Czartoski J, Wan YH et al. (2021) Antibodies elicited by SARS-CoV-2 infection and boosted by vaccination neutralize an emerging variant and SARS-CoV-1. medRxiv doi: https://doi.org/10.1101/2021.02.05.21251182
克隆大型病毒基因片段,用于全基因组组装 Xie X, Lokugamage KG, Zhang X et al. (2021) Engineering SARS-CoV-2 using a reverse genetic system. Nat Protoc 16(3):1761–1784.
克隆SARS-CoV-2 全基因组,用于功能研究Xie X, Muruato A, Lokugamage KG, et al. (2020) An Infectious cDNA Clone of SARS-CoV-2. Cell Host Microbe 27(5):841–848.

其他微生物

使用方法参考文献 
检测金黄色葡萄球菌基因的多重 PCR Allam A, Fakhr A, Mahmoud M et al. (2021) Staphylococcus aureus nasal colonization among health care workers at an Egyptian tertiary care hospital. Microbes and Infectious Diseases 2(1):108–118. 
对真菌样本的 gDNA 和 cDNA 进行 PCR,然后进行 Sanger 测序

 

Ferrara M, Gallo A, Perrone G et al. (2020) Comparative genomic analysis of ochratoxin A biosynthetic cluster in producing fungi: new evidence of a cyclase gene involvement. Front Microbiol 11:581309. 

订购信息

支持中心

PCR 学习中心
了解 PCR 的历史、PCR 反应配制所需考虑因素、DNA 聚合酶选择的重要性、常见 PCR 方法和应用以及疑难解答。

PCR 和 cDNA 合成支持中心
查找终点 PCR 和 cDNA 应用相关的实验建议、疑难解答及相关资源。

OEM 和定制 PCR 解决方案
查找可进行定制的生产解决方案、产品标签和包装,以满足您的特定需求。

联系我们
通过电子邮件或电话联系我们的技术应用专家,了解有关 PCR 酶和预混液的其它问题。

除非另有说明,否则所有商标均为赛默飞世尔科技公司及其子公司的财产。PrimeSTAR 是 Takara-Clontech Laboratories, Inc. Merck 是 Merck KGaA.KAPA HiFi HotStart 是 Roche Inc. HotStar 是 Qiagen GmbH 的商标。Roche Expand 是 Roche Molecular Systems Inc. PfuUltra 是安捷伦公司的商标。仅供科研使用,不可用于诊断目的。

All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified.。Q5 is a trademark of New England BioLabs Inc. PrimeSTAR is a trademark of Takara-Clontech Laboratories, Inc. Merck is a trademark of Merck KGaA.KAPA HiFi HotStart is a trademark of Roche Inc. HotStar is a trademark of Qiagen GmbH.Roche Expand is a trademark of Roche Molecular Systems Inc. PfuUltra is a trademark of Agilent, Inc.

仅供科研使用,不可用于诊断目的。