钙离子指示剂

钙离子检测试剂盒广泛用于通过 G 蛋白偶联受体（GPCR，一类与药物发现相关的大型活性靶标）对激动剂刺激和拮抗剂抑制的信号转导进行细胞内测量。在神经元中，细胞内钙离子在突触活性诱导和信号转导通路激活方面起着关键作用。作为衡量神经元活动的一项指标，钙离子的功能成像是神经科学研究的关键技术。

我们开发了多种 Molecular Probes 离子指示剂，用于借助强荧光信号和多种波长选项来跟踪钙离子。

选择用于成像的钙离子指示剂    选择用于 HTS 的钙离子指示剂

本页内容：

比率式钙离子指示剂

  • 荧光 Ca2+ 指示剂可以准确测量细胞内钙离子浓度
  • 比率式读数可最大程度地减少混合细胞群中光漂白、泄漏、不均匀染色和细胞厚度不同的影响，从而提供更可靠且更具重现性的结果

比率式测量具有多项优点，包括降低染料染色不均匀、染料泄漏和光漂白的影响。

此外，比率式钙离子指示剂减少了在测量不等厚细胞中的 Ca2+ 时出现的相关问题。Fura-2 和 Indo-1 通常分别用于通过监测激发或发射波长来测量钙离子浓度的变化。

fura-2的的荧光激发光谱
图1.含 0–39.8 µM 游离 Ca2+ 的溶液中 fura-2（F1200、F6799）的荧光激发光谱。

带静息信号的钙离子指示剂

  • Ca2+ 结合后信号增强14倍
  • 在静息 Ca2+ 水平发出背景荧光

每种 Oregon Green™ 钙离子指示剂都能以较高的亲和力结合细胞内钙离子，从而提供符合众多应用要求的灵敏度范围。Oregon Green 探针在静息 Ca2+ 水平发出绿色荧光，随着 Ca2+ 浓度的增加，其荧光强度增加14倍。该产品具有细胞不透过性配方可供选择，可通过显微注射、贴片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样，并以葡聚糖偶联物的形式在细胞中保留更长时间。

细胞可透过性配方可上样至细胞培养基中，并与微孔板检测试剂盒和流式细胞分析以及成像检测试剂盒兼容。

钙“泡”的共聚焦线扫描图像

图2.使用 Oregon Green 488 BAPTA-1 获得的非洲爪蟾卵母细胞中的钙“泡”共聚焦线扫描图像。

不带静息信号的钙离子指示剂

  • Ca2+ 结合后信号增强100倍
  • 在静息 Ca2+ 水平发出极少的荧光

Fluo 系列钙离子指示剂在静息 Ca2+ 水平发出极少的荧光，随着 Ca2+ 浓度的增加，其荧光强度均增加 >100倍。每种 fluo 染料均以特有的亲和力结合细胞内钙离子，从而提供与不同 Ca2+ 浓度相匹配的灵敏度范围。Fluo 染料有细胞不透过性配方可供选择，可通过显微注射、贴片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样。

细胞可透过性配方可上样至细胞培养基中，并与成像和微孔板检测试剂盒（包括 HTS）兼容。

用 5 µM Fluo-4 染色的 HeLa 细胞

图3.用 5 µM Fluo-4 染色的 HeLa 细胞。

长波长钙离子指示剂

  • 兼容 GFP 和绿色荧光染料
  • Rhod-2 可定位到线粒体

基于罗丹明的钙离子指示剂包含一系列用于检测 Ca2+ 浓度大幅或细微变化的探针。钙离子结合后，其荧光强度增加50倍，同时提供了多种波长，可与 GFP 或绿色荧光染料结合使用进行多重检测。

可以使用膜可透过性配方或通过显微注射、贴片移液器或胞饮细胞上样剂对细胞进行上样。特别是，Rhod-2 可定位到线粒体，并可与成像、流式细胞分析、微孔板检测试剂盒和 HCS 平台配合使用。

用 X-rhod-1 AM 染色的活牛肺动脉内皮细胞
图4.用 X-rhod-1 AM 染色的活牛肺动脉内皮细胞。

钙离子指示剂选择指南

 Fura-2，AMFura-2，五钾盐Fura Red，AMIndo-1，AMIndo-1，五钾盐
结果钙离子结合后，发生比率式激发波长变化钙离子结合后，发生比率式发射波长变化
首选检测方法激发波长变化激发波长变化
激发/发射波长（零浓度钙离子），nM363/510436/650355/475
激发/发射波长（高浓度钙离子），nM363/510472/650355/401
是否可透过细胞可透过不可透过可透过可透过不可透过
检测平台荧光显微镜检查荧光显微镜、流式细胞分析荧光显微镜、流式细胞分析
货号F1221F1200F3021I1223I1202
 
结果结合 Ca2+ 后荧光强度增加14倍。静息钙离子水平的可见荧光使得该染料有助于在刺激前显现细胞位置/结构。
检测范围检测细胞内钙离子的细微变化检测细胞内钙离子的中度变化检测细胞内钙离子的大幅变化
荧光基团Oregon Green 488 BAPTA-1Oregon Green 488 BAPTA-6FOregon Green 488 BAPTA-5N
标准滤光片组FITCFITC
激发/发射波长 (nm)494/523492/517
参考文献文献列表
是否可透过细胞？可透过不可透过不可透过不可透过不可透过
检测平台流式细胞分析、微孔板、成像成像成像成像成像
使用说明上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样葡聚糖可减少细胞泄漏通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样
产品规格10 x 50 µg500 µg5 mg500 µg500 µg
货号O6807O6806O6798O23990O6812
 
结果结合 Ca2+ 后荧光发射强度大幅增加（>100 倍），在静息钙离子水平发出极少的荧光。
检测范围检测细胞内钙离子的细微变化检测细胞内钙离子的中度变化检测细胞内钙离子的大幅变化
荧光基团Fluo-4Fluo-5FFluo-4FF
标准滤光片组FITC
激发/发射波长 (nm)494/506494/516494/516
参考文献文献列表文献列表文献列表
是否可透过细胞？可透过不可透过可透过不可透过可透过不可透过
检测平台成像、流式细胞分析、微孔板、HCS成像成像、流式细胞分析、微孔板、HCS成像成像、流式细胞分析、微孔板、HCS成像
使用说明上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样
产品规格10 x 50 µg500 µg10 x 50 µg500 µg10 x 50 µg500 µg
货号F14201F14200F14222F14221F23981F23980
 X-Rhod-1，AM，可透过细胞
结果结合 Ca2+ 后荧光发射强度大幅增加。可与 GFP 或绿色荧光染料结合使用。
检测范围定位到线粒体检测 Ca2+ 的细微变化检测 Ca2+ 的大幅变化
荧光基团Rhod-2X-Rhod-1X-Rhod-5F
标准滤光片组TRITC罗丹明罗丹明
激发/发射波长 (nm)552/581580/602581/603
参考文献文献列表文献列表
是否可透过细胞？可透过不可透过可透过可透过不可透过
检测平台成像、流式细胞分析、微孔板、HCS成像成像成像成像
使用说明上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样上样到细胞培养基中上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样
产品规格20 x 50 µg1 mg10 x 50 µg10 x 50 µg500 µg
货号R1244R14220X14210X23985X23984
比率式钙离子
指示剂
 Fura-2，AMFura-2，五钾盐Fura Red，AMIndo-1，AMIndo-1，五钾盐
结果钙离子结合后，发生比率式激发波长变化钙离子结合后，发生比率式发射波长变化
首选检测方法激发波长变化激发波长变化
激发/发射波长（零浓度钙离子），nM363/510436/650355/475
激发/发射波长（高浓度钙离子），nM363/510472/650355/401
是否可透过细胞可透过不可透过可透过可透过不可透过
检测平台荧光显微镜检查荧光显微镜、流式细胞分析荧光显微镜、流式细胞分析
货号F1221F1200F3021I1223I1202
带静息信号的 Ca2+ 指
示剂
 
结果结合 Ca2+ 后荧光强度增加14倍。静息钙离子水平的可见荧光使得该染料有助于在刺激前显现细胞位置/结构。
检测范围检测细胞内钙离子的细微变化检测细胞内钙离子的中度变化检测细胞内钙离子的大幅变化
荧光基团Oregon Green 488 BAPTA-1Oregon Green 488 BAPTA-6FOregon Green 488 BAPTA-5N
标准滤光片组FITCFITC
激发/发射波长 (nm)494/523492/517
参考文献文献列表
是否可透过细胞？可透过不可透过不可透过不可透过不可透过
检测平台流式细胞分析、微孔板、成像成像成像成像成像
使用说明上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样葡聚糖可减少细胞泄漏通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样
产品规格10 x 50 µg500 µg5 mg500 µg500 µg
货号O6807O6806O6798O23990O6812
不带静息信号的 Ca2+ 指
示剂
 
结果结合 Ca2+ 后荧光发射强度大幅增加（>100 倍），在静息钙离子水平发出极少的荧光。
检测范围检测细胞内钙离子的细微变化检测细胞内钙离子的中度变化检测细胞内钙离子的大幅变化
荧光基团Fluo-4Fluo-5FFluo-4FF
标准滤光片组FITC
激发/发射波长 (nm)494/506494/516494/516
参考文献文献列表文献列表文献列表
是否可透过细胞？可透过不可透过可透过不可透过可透过不可透过
检测平台成像、流式细胞分析、微孔板、HCS成像成像、流式细胞分析、微孔板、HCS成像成像、流式细胞分析、微孔板、HCS成像
使用说明上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样
产品规格10 x 50 µg500 µg10 x 50 µg500 µg10 x 50 µg500 µg
货号F14201F14200F14222F14221F23981F23980
长波长钙离子
指示剂
 X-Rhod-1，AM，可透过细胞
结果结合 Ca2+ 后荧光发射强度大幅增加。可与 GFP 或绿色荧光染料结合使用。
检测范围定位到线粒体检测 Ca2+ 的细微变化检测 Ca2+ 的大幅变化
荧光基团Rhod-2X-Rhod-1X-Rhod-5F
标准滤光片组TRITC罗丹明罗丹明
激发/发射波长 (nm)552/581580/602581/603
参考文献文献列表文献列表
是否可透过细胞？可透过不可透过可透过可透过不可透过
检测平台成像、流式细胞分析、微孔板、HCS成像成像成像成像
使用说明上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样上样到细胞培养基中上样到细胞培养基中通过显微注射、膜片移液器或胞饮细胞上样剂进行上样
产品规格20 x 50 µg1 mg10 x 50 µg10 x 50 µg500 µg
货号R1244R14220X14210X23985X23984

相关资源

仅供科研使用，不可用于诊断目的。