Best Practices for Intracellular Flow Cytometry

最佳流式胞内实验方案

细胞内蛋白的染色和检测能够鉴定不同的细胞亚群和确定细胞表型特征;在设计流式实验时,我们的资源、工具和产品能帮助您节省时间、提高效率。

使用我们的检索工具,可以轻松快速地找到您需要的抗体,节省时间。

查找流式抗体

在流式胞内染色时,选择合适的固定破膜缓冲液,对数据质量和准确度具有重要影响;我们在细胞浆内、细胞核内和分泌蛋白的流式染色实验中提供了各种优化的实验方案。

  • 固定破膜缓冲液对数据质量和准确度具有重要影响
  • 使用我们的优化染色缓冲液,您将发现它的与众不同

细胞浆染色

 eBioscience 细胞内固定&透化缓冲液套件FIX&PERM细胞固定&破膜试剂盒
用途
  • 对细胞浆内的蛋白进行染色,还有分泌途径中的蛋白,如趋化因子和细胞因子。
  • 不建议用于细胞核内染色。

了解有关Fix&Perm细胞固定破膜试剂盒的更多信息
  • 对胞内标记进行染色,比如细胞质酶或细胞核酶、肿瘤蛋白、细胞因子和免疫球蛋白等。
  • 温和地固定和透化细胞,同时保证细胞形态的散射特性不受影响。
了解有关FIX&PERM细胞固定破膜试剂盒的更多信息
组分
  • 胞内固定缓冲液
  • 破膜缓冲液(10X)
  • 固定液(A液)
  • 破膜液(B液)
规格1 试剂盒50 次反应
货号88-8824-00GAS003
监管状态RUO–仅供研究使用,不可用于诊断程序。GPR-通用试剂。
仅用于研究(即任何样本类型的研究实验)应用于常规实验室,可用于收集、制备和检测人源标本,以用于诊断目的。

细胞核内染色

 eBioscience Foxp3/转录因子染色
缓冲液套装
用途
  • 适用于抗体染色转录因子和细胞核蛋白(如Foxp3和Ki-67)。
  • 也适用于同时染色细胞核内和细胞质(细胞因子和转录因子)。
了解有关Foxp3/转录因子染色缓冲液套装的更多信息
组分
  • 固定/破膜浓缩液
  • 固定/破膜稀释液
  • 破膜缓冲液 (10X)
规格1 试剂盒
货号00-5523-00

使用Invitrogen LIVE/DEAD可固定死活细胞染料,有效地去除死细胞及碎片,可以节省时间并且准确地分析细胞群。

生物学对照
  • 细胞固定和破膜会引起细胞死亡,有很多细胞碎片
  • 节省时间,并且准确地分析细胞群
  • 有效去除死细胞和细胞碎片

查找LIVE/DEAD™试剂盒,激发激光有:紫外&& 405 nm激光 | 488 & 561 nm激光 | 633 & 635 nm激光

紫外 & 405 nm激光

 LIVE/DEAD 可固定蓝色
染料
LIVE/DEAD 可固定紫色
染料
LIVE/DEAD 可固定Aqua
染料
LIVE/DEAD 可固定黄色
染料
实验原理LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain kits是可固定的细胞活性染料,可根据细胞膜完整性和是否与胺基反应来区分活细胞和死细胞。然后,细胞可被固定进行细胞内抗原检测,且不丢失细胞表面蛋白的染色,最终根据流式结果轻松排除死细胞。
结果死细胞亮度很强,与几乎不亮的活细胞很容易区分出来。
激光 (nm)
UV
405
405
405
Ex/Em (nm)
350/450
416/451
367/526
400/575
参考文献
文献列表
多色配色
染料相容性不可与Indo-1(蓝色)、DAPI或Hoechst 33342等一起使用不可与Pacific Blue染料、CellTrace Violet染料、FxCycle Violet染料、BV421或eFluor 450等一起使用不可与Pacific Green染料、F2N12S凋亡试剂盒、AmCyan或BV510等一起使用不可与Pacific Orange染料、Qdot 605、F2N12S凋亡试剂盒或BV605等一起使用
可固定
样品类型
活细胞
规格80 次检测
货号

488 & 561 nm激光

 LIVE/DEAD 可固定绿色染料LIVE/DEAD 可固定红色染料
基本原理LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain kits是可固定的细胞活性染料,可根据细胞膜完整性和是否与胺基反应来区分活细胞和死细胞。然后,细胞可被固定进行细胞内抗原检测,且不丢失细胞表面蛋白的染色,最终根据流式结果轻松排除死细胞。
结果死细胞亮度很强,与几乎不亮的活细胞很容易区分出来。
激光 (nm)
488
488
561
Ex/Em (nm)
495/520
595/615
参考文献
文献列表
多色配色
染料相容性不可与FITC、Alexa Fluor 488、GFP或CellTrace CSFE染料等一起使用不可与R-PE、碘化丙啶(PI)、SYTOX AADvanced染料、7-AAD、PE-Alexa Fluor 610和PE-Texas Red串联染料等一起使用
可固定
样品类型
活细胞
规格80 次检测
货号

633 & 635 nm激光

 LIVE/DEAD 可固定远红外染料LIVE/DEAD 可固定近红外染料
实验原理LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain kits是可固定的细胞活性染料,可根据细胞膜完整性和是否与胺基反应来区分活细胞和死细胞。然后,细胞可被固定进行细胞内抗原检测,且不丢失细胞表面蛋白的染色,最终根据流式结果轻松排除死细胞。
结果死细胞亮度很强,与几乎不亮的活细胞很容易区分出来。
激光 (nm)
633/635
633/635
Ex/Em (nm)
650/665
750/775
参考文献
文献列表
多色配色
染料相容性不可与APC、 Alexa Fluor 647染料、FxCycle Far Red 和 CellTrace Far Red 染料等一起使用不可与APC-Alexa Fluor 750、APC-Cy7或Vybrant DyeCycle Ruby染料等一起使用
可固定
样品类型
活细胞
规格80 次检测
货号
L34973
L34975

流式实验中抗原靶标染色需要多种抗体,而使用这些抗体经常发生染料的发射光谱重叠。这时荧光溢漏必须准确地调节补偿,目的是为了确定检测到的荧光信号来自于目标染料,相应确定目标细胞群体。

实验对照
  • 轻松地准确设置您的实验抗体补偿对照,节省时间
  • 单管预混制备:只需一滴,即可完成抗体补偿对照

了解有关eBeads抗体荧光补偿微球的更多信息

     UltraComp eBeads
    用途该微球作用是对流式抗体上荧光染料进行补偿调节,这些微球由每个荧光染料偶联抗体染色,可用作单色补偿对照。
    反应性仓鼠、小鼠和大鼠来源抗体以及识别κ和λ链
    产品形式单管形式,每次使用一滴
    激光兼容性 可兼容大部分标准激光,从紫外光至633nm激光
    规格25 次检测
    货号01-2222-41

    使用我们的检索工具,可以轻松快速地找到您需要的抗体,节省时间。

    查找流式抗体

    在流式胞内染色时,选择合适的固定破膜缓冲液,对数据质量和准确度具有重要影响;我们在细胞浆内、细胞核内和分泌蛋白的流式染色实验中提供了各种优化的实验方案。

    • 固定破膜缓冲液对数据质量和准确度具有重要影响
    • 使用我们的优化染色缓冲液,您将发现它的与众不同

    细胞浆染色

     eBioscience 细胞内固定&透化缓冲液套件FIX&PERM细胞固定&破膜试剂盒
    用途
    • 对细胞浆内的蛋白进行染色,还有分泌途径中的蛋白,如趋化因子和细胞因子。
    • 不建议用于细胞核内染色。

    了解有关Fix&Perm细胞固定破膜试剂盒的更多信息
    • 对胞内标记进行染色,比如细胞质酶或细胞核酶、肿瘤蛋白、细胞因子和免疫球蛋白等。
    • 温和地固定和透化细胞,同时保证细胞形态的散射特性不受影响。
    了解有关FIX&PERM细胞固定破膜试剂盒的更多信息
    组分
    • 胞内固定缓冲液
    • 破膜缓冲液(10X)
    • 固定液(A液)
    • 破膜液(B液)
    规格1 试剂盒50 次反应
    货号88-8824-00GAS003
    监管状态RUO–仅供研究使用,不可用于诊断程序。GPR-通用试剂。
    仅用于研究(即任何样本类型的研究实验)应用于常规实验室,可用于收集、制备和检测人源标本,以用于诊断目的。

    细胞核内染色

     eBioscience Foxp3/转录因子染色
    缓冲液套装
    用途
    • 适用于抗体染色转录因子和细胞核蛋白(如Foxp3和Ki-67)。
    • 也适用于同时染色细胞核内和细胞质(细胞因子和转录因子)。
    了解有关Foxp3/转录因子染色缓冲液套装的更多信息
    组分
    • 固定/破膜浓缩液
    • 固定/破膜稀释液
    • 破膜缓冲液 (10X)
    规格1 试剂盒
    货号00-5523-00

    使用Invitrogen LIVE/DEAD可固定死活细胞染料,有效地去除死细胞及碎片,可以节省时间并且准确地分析细胞群。

    生物学对照
    • 细胞固定和破膜会引起细胞死亡,有很多细胞碎片
    • 节省时间,并且准确地分析细胞群
    • 有效去除死细胞和细胞碎片

    查找LIVE/DEAD™试剂盒,激发激光有:紫外&& 405 nm激光 | 488 & 561 nm激光 | 633 & 635 nm激光

    紫外 & 405 nm激光

     LIVE/DEAD 可固定蓝色
    染料
    LIVE/DEAD 可固定紫色
    染料
    LIVE/DEAD 可固定Aqua
    染料
    LIVE/DEAD 可固定黄色
    染料
    实验原理LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain kits是可固定的细胞活性染料,可根据细胞膜完整性和是否与胺基反应来区分活细胞和死细胞。然后,细胞可被固定进行细胞内抗原检测,且不丢失细胞表面蛋白的染色,最终根据流式结果轻松排除死细胞。
    结果死细胞亮度很强,与几乎不亮的活细胞很容易区分出来。
    激光 (nm)
    UV
    405
    405
    405
    Ex/Em (nm)
    350/450
    416/451
    367/526
    400/575
    参考文献
    文献列表
    多色配色
    染料相容性不可与Indo-1(蓝色)、DAPI或Hoechst 33342等一起使用不可与Pacific Blue染料、CellTrace Violet染料、FxCycle Violet染料、BV421或eFluor 450等一起使用不可与Pacific Green染料、F2N12S凋亡试剂盒、AmCyan或BV510等一起使用不可与Pacific Orange染料、Qdot 605、F2N12S凋亡试剂盒或BV605等一起使用
    可固定
    样品类型
    活细胞
    规格80 次检测
    货号

    488 & 561 nm激光

     LIVE/DEAD 可固定绿色染料LIVE/DEAD 可固定红色染料
    基本原理LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain kits是可固定的细胞活性染料,可根据细胞膜完整性和是否与胺基反应来区分活细胞和死细胞。然后,细胞可被固定进行细胞内抗原检测,且不丢失细胞表面蛋白的染色,最终根据流式结果轻松排除死细胞。
    结果死细胞亮度很强,与几乎不亮的活细胞很容易区分出来。
    激光 (nm)
    488
    488
    561
    Ex/Em (nm)
    495/520
    595/615
    参考文献
    文献列表
    多色配色
    染料相容性不可与FITC、Alexa Fluor 488、GFP或CellTrace CSFE染料等一起使用不可与R-PE、碘化丙啶(PI)、SYTOX AADvanced染料、7-AAD、PE-Alexa Fluor 610和PE-Texas Red串联染料等一起使用
    可固定
    样品类型
    活细胞
    规格80 次检测
    货号

    633 & 635 nm激光

     LIVE/DEAD 可固定远红外染料LIVE/DEAD 可固定近红外染料
    实验原理LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain kits是可固定的细胞活性染料,可根据细胞膜完整性和是否与胺基反应来区分活细胞和死细胞。然后,细胞可被固定进行细胞内抗原检测,且不丢失细胞表面蛋白的染色,最终根据流式结果轻松排除死细胞。
    结果死细胞亮度很强,与几乎不亮的活细胞很容易区分出来。
    激光 (nm)
    633/635
    633/635
    Ex/Em (nm)
    650/665
    750/775
    参考文献
    文献列表
    多色配色
    染料相容性不可与APC、 Alexa Fluor 647染料、FxCycle Far Red 和 CellTrace Far Red 染料等一起使用不可与APC-Alexa Fluor 750、APC-Cy7或Vybrant DyeCycle Ruby染料等一起使用
    可固定
    样品类型
    活细胞
    规格80 次检测
    货号
    L34973
    L34975

    流式实验中抗原靶标染色需要多种抗体,而使用这些抗体经常发生染料的发射光谱重叠。这时荧光溢漏必须准确地调节补偿,目的是为了确定检测到的荧光信号来自于目标染料,相应确定目标细胞群体。

    实验对照
    • 轻松地准确设置您的实验抗体补偿对照,节省时间
    • 单管预混制备:只需一滴,即可完成抗体补偿对照

    了解有关eBeads抗体荧光补偿微球的更多信息

       UltraComp eBeads
      用途该微球作用是对流式抗体上荧光染料进行补偿调节,这些微球由每个荧光染料偶联抗体染色,可用作单色补偿对照。
      反应性仓鼠、小鼠和大鼠来源抗体以及识别κ和λ链
      产品形式单管形式,每次使用一滴
      激光兼容性 可兼容大部分标准激光,从紫外光至633nm激光
      规格25 次检测
      货号01-2222-41

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      资源

      流式细胞分析实验方案

      光谱流式基础知识

      流式胞内染色示意小视频—细胞因子和核内靶点检测

      流式细胞术学习中心—获取流式细胞术学习资源,以轻松计划、顺利开展流式实验。

      Panel Builder流式配色工具—这款简单、定制化的在线工具可助您轻松解决多色流式实验的配色难题。

      5步法实验资源

      支持

      流式细胞支持中心—查找流式细胞工作流程中各种技术支持,包括实验技巧和深入疑难解答等。

      流式配色设计支持—联系赛默飞科学家,讨论您的实验需求、解决您遇到的实验问题。

      联系我们

      不可转售。Super Bright聚合物染料由Becton, Dickinson and Company授权销售。