灵敏的特异性核酸、内毒素和蛋白质定量检测
Invitrogen Qubit 检测使用靶向标选择性染料，只有与 DNA、RNA 或蛋白质靶标结合时才会发射荧光。它们比传统的紫外吸光法更准确。传统的紫外吸光法会因盐、溶剂、洗涤剂、蛋白至以及游离核苷酸等污染物的影响而高估了样品浓度。荧光测量法也比紫外吸光法的灵敏度高很多，而 Qubit 荧光计能够在不被干扰下准确测量稀释的样品。
提示：对于高通量的定量分析，请考虑使用具有荧光功能的酶标仪。 Thermo Scientific Varioskan ALF 和 Varioskan LUX 多功能酶标仪，可与 Quant-iT 检测试剂盒 搭配，与 Qubit 荧光计和测定试剂盒一样，可对相同的分析物进行量化分析。有关产品比较信息，请参阅我们的 RNA/DNA Quantification（RNA/DNA 定量页面）。
特点
虽然 Qubit 检测的不同之处在于所测量的分析物，但其共通的特性使其具有选择性、灵敏性及与 Qubit 4 或 Flex 荧光计配合使用的易用性。
染料可选择性地结合至 DNA、RNA 或蛋白质
与紫外吸光度法和传统 Bradford 蛋白质检测相比更灵敏
染料只有与靶标结合时才会发射荧光
可大幅度减少降解的 DNA 或 RNA 等污染物的影响
易于操作
只需要混合然后读数即可
孵育时间短
DNA 和 RNA 检测仅需2分钟，蛋白质检测仅需10-15分钟
为 Qubit 荧光计而设计
为用于 Qubit 4 和 Qubit Flex 荧光计而优化
检测定量范围的比较
Qubit 检测试剂可用于双链和单链 DNA（dsDNA 及 ssDNA）、RNA、microRNA 和蛋白质。Qubit DNA 和 RNA 检测试剂提供了不同的定量范围。HS（高灵敏度）检测试剂可以定量低浓度的分析物。BR（宽范围）检测试剂可以在更大的范围内定量。RNA XR（扩展范围）检测试剂则是高丰度样品的理想选择。如此多样的检测范围可对更大浓度范围内的准确测量提供支持。如图所示，与紫外吸光法相比，Qubit HS 和 BR 检测可检出更低浓度的 分析物。
Qubit 荧光法和紫外吸收法的样品浓度范围
使用 Qubit 系统可进行高的荧光定量灵敏度，可以对低丰度样品进行定量，并且只会测量预期靶标，即使样品中同时包含 DNA 和 RNA 亦是如此。标准的紫外吸光法灵敏度不足，无法检测低浓度的分析物，并且因为不能区分 RNA 与 DNA，会定量样品中的所有核酸。
此外，使用 Qubit 系统的荧光定量可以区分同一样品中的 RNA 和 DNA，而紫外吸收度法则通常无法做到这点。Qubit 平台提供的完整解决方案对检测、耗材和仪器进行联合优化，从而实现了出色性能，让您对结果的可靠性充满信心。
DNA 定量检测
Qubit dsDNA 检测试剂提供两个定量范围（HS 和 BR）和两种形式（标准品和 1X），这两者都是下游应用和处理的重要因素。此外还提供用于定量 ssDNA 和寡核苷酸的检测。
DNA 定量检测
产品 | 初始样品浓度 | 定量范围 | 检测次数 | 货号 |
高灵敏度 dsDNA 检测 | ||||
Qubit 1X dsDNA HS 检测试剂盒 | 0.005–120 ng/µL | 0.1-120 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit dsDNA HS 检测试剂盒 | 0.005–120 ng/µL | 0.1-120 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit 1X dsDNA HS 检测试剂盒 λ 标准品 | — | — | 500 | |
宽范围 dsDNA 检测试剂盒 | ||||
Qubit 1X dsDNA BR 检测试剂盒 | 0.2–4,000 ng/µL | 4-4,000 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit dsDNA BR 检测试剂盒 | 0.2–2,000 ng/µL | 4-2,000 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit 1X dsDNA BR 检测试剂盒 λ 标准品 | — | — | 500 | |
ssDNA 检测 | ||||
Qubit ssDNA 检测试剂盒 | 0.01–240 ng/µL | 0.2-240 ng | 100 | |
dsDNA 定量检测
相对于 RNA 和 ssDNA，我们的 Qubit dsDNA 高灵敏度 (HS) 和宽范围 (BR) 检测试剂盒对 dsDNA 具有高度选择性。高灵敏度分析专为低浓度的 dsDNA 样品而设计，有助于节省珍贵样品。dsDNA HS 和 BR 检测试剂盒能够与盐、游离核苷酸、RNA、溶剂、洗涤剂或蛋白质等常见污染物兼容。
Qubit dsDNA HS 检测结果
Qubit 4（显示）或 Qubit Flex 荧光计上的结果可以数字或图形方式显示。这些图像显示了我们设计用于低 DNA 浓度样本的高灵敏度 (HS) dsDNA 检测结果。
本测试中使用 Qubit dsDNA HS 和 BR 检测试剂盒评估了 Qubit 4 和 Flex 荧光计以及其他品牌仪器的准确度和精度。Qubit 4 和 Flex 仪器的百分比偏差和 CV 值均低于其他品牌，表现出更高的准确度和精度。
Qubit 1X 检测形式不仅省时而且对环境友好
Qubit 1X dsDNA 检测试剂盒以便捷的预混合形式提供，无需制备 Qubit 工作溶液。您只需在预混溶液中添加样本或标准品，然后进行孵育，即可读取结果。这种形式提供了简化、快速的工作流程，同时减少了试剂盒中的试管数（以及所使用塑料的数量）。
Qubit 1X dsDNA HS 检测试剂盒具有与标准 dsDNA HS 检测试剂盒相同的动态范围和检测限，但其动态范围比标准 dsDNA BR 检测试剂盒更高，可实现理想高的 4,000 ng/µL 扩展范围。
在 Qubit 1X dsDNA HS（左）和 BR（右）检测的核心范围内进行测试时，即使在 RNA 的等量存在下，测得的 dsDNA 数量与预期值相差小于 10%。
A) Qubit 1X dsDNA HS 检测
B) Qubit 1X dsDNA BR 检测
Qubit 1X dsDNA HS (A) 和 BR (B) 检测的选择性
图显示了用已知数量的 DNA 和 RNA 接种的样本的定量结果与预期值的对比。圆圈代表含有 10 μL DNA 加 190 μ L 的工作溶液样品，浓度各不相同。方形代表含有 10 μL RNA、10 μL DNA 加 180 μ L 的工作溶液样品，浓度各不相同。圆圈和方形距离很近，有些情况下甚至几乎无法区分，表明这两种 dsDNA 检测不太受 RNA 的影响。
ssDNA 定量检测
Qubit ssDNA 检测试剂盒设计用于定量分析长的 ssDNA 或寡核苷酸。因其也可检测到 dsDNA 和 RNA，请在检测前提纯 ssDNA。但是，检测结果不受常见污染物的影响，如盐、短寡核苷酸（≤6 个碱基）、游离核苷酸、溶剂、洗涤剂或蛋白质。
有三种 Qubit RNA 检测可用于定量不同浓度范围的大 RNA，且有一种检测可用于定量小 RNA 分子 (microRNA)。有关测量 RNA 样品完整性和质量的其他检测方法，请参见下一节 RNA IQ 检测。
大 RNA 定量检测
产品 |
初始样品浓度 |
定量范围 |
检测次数 |
货号 |
常规 RNA 检测 |
||||
Qubit RNA HS 高灵敏检测试剂盒 |
0.2–200 ng/µL |
4-200 ng |
100 |
|
500 |
||||
Qubit RNA BR 宽范围检测试剂盒 |
0.5–1,200 ng/µL |
10-1,200 ng |
100 |
|
500 |
||||
Qubit RNA XR 拓展范围检测试剂盒 |
5–20,000 ng/µL |
100-20,000 ng |
100 |
|
500 |
||||
microRNA 检测 |
||||
Qubit microRNA 检测试剂盒 |
0.025–150 ng/µL |
0.5-150 ng |
100 |
|
500 |
||||
RNA 定量检测
RNA 定量检测
定量 RNA 时，您可以在三种 Qubit RNA 检测试剂盒中进行选择，这些检测试剂盒的初始样本浓度范围重叠，从最少的 250 pg/μL 到 10,000 ng/μL。相对于双链 DNA (dsDNA)，这些试剂盒对于 RNA 具有高度选择性。与其他 RNA 检测试剂盒不同的是，这些检测试剂盒在即使样品中存在 DNA 的情况下，不需要 DNA 酶也可准确测量。这些检测对于常见污染如盐、游离核苷酸、溶剂、变性剂或蛋白质等，有着很好的适应性。
在此灵敏度测试中，Qubit RNA 和 microRNA 检测（红色和蓝色条）与靶向 RNA （红色和蓝色线）的实际浓度是接近的。
Qubit RNA 和 microRNA 检测的灵敏度
依 x 轴上所列的浓度，将核糖体 RNA (rRNA) 添加到含有 2 μg/mL siRNA 的样品中。然后使用 Qubit microRNA 检测试剂盒、 Qubit RNA 检测试剂盒和通过紫外吸光度定量的 NanoDrop A260 检测试剂盒对混合物进行检测。显示8个重复次数的结果平均值和标准差。NanoDrop 仪器（紫色条）的总 RNA 浓度检测限是 1.5 μg/mL，影响了其较低浓度下的准确度和精度。Qubit RNA 检测试剂盒（红色条）在较大范围内准确定量了 rRNA 浓度。Qubit microRNA 检测试剂盒（蓝色条）准确定量了 2 μg/mL 的 siRNA 浓度，而当 rRNA 从该量增加2到5倍时，准确性受到轻微影响。蓝色和红色趋势线分别指示了样本中的 siRNA 和 rRNA 的实际浓度。
microRNA 定量检测
Invitrogen Qubit microRNA 检测试剂盒设计用于对 microRNA 等小 RNA（17–25 nt 或 bp）轻松、精准地定量，即使存在盐、游离核苷酸、溶剂、洗涤剂或蛋白质等常规污染物等也可完成测定。相对于 rRNA 或较大的信使 RNA (mRNA ) (>1,000 bp)，该检测对于小 RNA 具有高度选择性。
提纯样品中的小 RNA 可在检测管中以低至 0.5 ng 的水平重复定量。该检测可检测所有类型的小 RNA、包括 microRNA 和短干扰 RNA (siRNA)，且单链和双链均可。因其不检测核苷酸，所以也可区分小 mRNA 颗粒与完全降解的 RNA。
RNA 完整性及质量 (IQ) 检测
Qubit RNA IQ 检测的开发是为了快速评价 RNA 样本的完整性和质量 (IQ)。它使用两种染料：一种可与较大且完整和/或结构化的 RNA 结合，而另一种可与较小的降解 RNA 结合。此检测无需特殊处理、繁琐的样本制备或等待结果。
RNA 质量检测
蛋白质定量检测
Qubit 蛋白质检测试剂盒让蛋白质的定量更加轻松、准确。这两种试剂盒拥有重叠的浓度范围，可在 12.5 μg/mL 到 20 mg/mL 的初始样品浓度内保持准确，且不同的蛋白质间的定量检测变异较小。Qubit 蛋白质检测易于操作，仅需10-15分钟的室温孵育，无需长时间孵育或暴露于升高的温度下。
蛋白质定量检测
内毒素检测测定
Qubit 内毒素检测测定旨在与 Qubit Flex 荧光计结合使用，可进行高效的荧光终点测定，以定量蛋白质、多肽、抗体或核酸样品等多种样品类型中的内毒素。可以使用不同的样品量进行此测定，通过简化的工作流程实现 0.01-10.0 EU/mL 的动态范围。Qubit 内毒素检测测定试剂盒的主要特点和优势包括：
- 灵敏度高且测定范围广—可检测低至 0.01 EU/mL 至 10.0 EU/mL 的样品量水平
- 适用于多种样品—包括蛋白质、质粒制备物、DNA 和 RNA
- 易于使用—与 Qubit Flex 荧光计结合使用时，自动执行计算，有助于减少出错的可能性
系统验证检测
Invitrogen Qubit 系统验证试剂盒是一款快速、易用、基于试剂的检测，可检测 Qubit 4 和 Qubit Flex 荧光计的性能。该试剂盒由三部分组成：空白试剂溶液、绿色荧光试剂和远红外荧光试剂。绿色荧光试剂在荧光计上用来检测蓝色激发光（470 nm LED；430-495 nm 激发滤光片）和绿色荧光（510-580 nm 发射滤光片），而远红外荧光试剂则用来检测红色激发光（635 nm LED；600-645 nm 激发滤光片）和远红外荧光（665-720 nm 发射滤光片）。
系统验证检测
MyQubit 自定义和预配置检测
自定义 MyQubit 检测允许您在几分钟内为 Qubit 荧光计创建更多的检测项目。在光谱上与 Qubit 硬件兼容的试剂或检测均可用于 Invitrogen Qubit 荧光计。此外也提供几种预先配置的 MyQubit 检测供您下载。
创建新的 MyQubit 检测
MyQubit 检测可为您的实验室工作提供可自定义的荧光检测平台，使您得以满足多种定量检测需求，包括实验室研究、质控、工艺监测及更多应用。您只需简单地下载 .qbt 文件并使用 USB 驱动器传输，即可为 Qubit 3.0 和 4 型荧光计中添加新检测。
下载预配置的 MyQubit 检测项目
作为您可创建的自定义 MyQubit 检测的示例，我们已使用 Amplex Red 试剂开发了几种适用于常见定量分析物的新 MyQubit 检测。在您使用 USB 驱动器将检测的 .qbt 文件传输至 Qubit 荧光计后，它们将可与出厂预置的 Qubit 检测一同供您选择，从而扩展了 Qubit 荧光计的功能。
可用于下载的预配置 MyQubit 检测
检测 | 下载 Qubit 3.0 和 4 | 下载 Qubit 2.0* | PDF 手册 |
Amplex Red 胆固醇检测 | |||
Amplex Red 半乳糖检测 | |||
Amplex 葡萄糖检测 | |||
Amplex Red 谷氨酸检测 | |||
Amplex Red 过氧化氢检测 | |||
Amplex Red 蔗糖检测 |
* Qubit 2.0 荧光计需要 2 GB 或更小的 USB 驱动器（如仪器随附的驱动器）才能传输 MyQubit 文件。
若要下载 .qbt 文件，请在表格中点击您感兴趣的 .qbt 文件链接。将自动下载文件到您的计算机。请确保您点击的是与您的 Qubit 型号对应的正确链接。有关将 .qbt 文件上传至 Qubit 荧光计的说明，请参阅检测的 PDF 手册。
Ion Sphere 质量控制试剂盒
在 下一代测序 (NGS) 的 Ion Torrent 方法中，每个扩增子在模板准备过程中都会在 Ion Sphere Particle（ISP）上创建多个副本。测序 DNA 或 RNA 之前，必须获知阳性模板 ISP 的数量。
在 Ion Personal Genome Machine (PGM) 或 Ion GeneStudio 系统上运行 NGS 前，可在 Qubit 荧光计上使用 Ion Sphere 质控试剂盒对富集的 ISP 进行快速简单的评估。 ISP 会与绿色荧光染料 Invitrogen Alexa Fluor 488 标记的互补寡核苷酸结合，而只有阳性模板的磁珠才会与红色荧光染料 Invitrogen Alexa Fluor 647 标记的互补寡核苷酸结合。
Ion Sphere 检测
产品 | 检测次数 | 货号 |
Ion Sphere 质控试剂盒（仅限 Qubit 4） | 20 |
Qubit 荧光计可检测各染料共轭体的荧光发射，并使用 Excel 文件模板而根据 Alexa Fluor 647 染料与 Alexa Fluor 488 染料信号的比例来计算阳性模板 ISP 的百分比。此使用 Qubit 荧光计的质控步骤有助于判断成功进行测序的可能性，从而可节省后续测序的时间和费用。
Ion Sphere 颗粒检测原理
B 核酸序列同时存在于 ISP 引物及模板中，用于驱动模板在磁珠上的扩增，而 A 序列只存在于模板中。使用 Invitrogen Alexa Fluor 染料，您可通过由 Alexa Fluor 647（红色）及 Alexa Fluor 488（绿色）染料标记的核苷酸的荧光信号比例，来确定阳性模板微粒的相对数量。
仅供研究使用。不可用于诊断程序。