Gibco人神经干细胞 (H9细胞来源)

1. 人神经干细胞 (>1 x 10⁶个细胞)
2. StemPro NSC SFM培养基 (KnockOut™ DMEM/F-12、StemPro NSC SFM添加剂、重组碱性FGF蛋白和重组EGF蛋白)

StemPro NSC SFM培养基使人NSC细胞在进行贴壁培养时，扩增良好 (图1)。

GIBCO为下列培养条件提供详细实验方案：
贴壁培养方案

图1. 相差显微镜 (10倍) 拍摄复苏后在StemPro NSC SFM培养基中培养的GIBCO hNSC细胞第1天 (图中A部分) 和第3天 (图中B部分) 的照片。

StemPro NSC SFM完全培养基中的碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF) 可维持GIBCO hNSC细胞的非分化状态。 Human NSCs cultured in StemPro NSC SFM stain positive for the neural stem cell-type specific markers nestin and SOX2, and the proliferation marker Ki67 (>80%) (Figure 2).

图 2. StemPro NSC SFM培养基中培养的GIBCO hNSC在P3通道的荧光图片 (20X)，并对NSC表型标志物巢蛋白 (绿色) 和增殖标识物Ki67 (红色) 进行了染色。 细胞核用DAPI (蓝色荧光) 复染。 大约90%的未分化NSC标志物巢蛋白和增殖标志物Ki67染色结果为阳性。 无Oct4染色阳性说明培养物中没有残余的hESC细胞。

一旦撤除培养基中的bFGF和EGF，GIBCO hNSC细胞可自发分化为神经元细胞、少突胶质细胞或星形胶质细胞。 此外，在选择分化培养基中可向特定的细胞谱系分化 (图3)。
参见人NSC细胞的自发分化实验方案

图3. StemPro NSC SFM培养基中培养的GIBCO hNSC细胞荧光图片 (20倍)，显示经过3次传代后，可分化为神经元细胞、少突胶质细胞或星形胶质细胞。 一旦进入定向分化，细胞即开始失去非分化NSC细胞标志物巢蛋白的表达，而分化细胞标志物Dcx、GalC和GFAP表达都是阳性。 在定向分化前，对非分化NSC细胞标志物巢蛋白 (红色) 和SOX2 (绿色) 进行染色 (图中A部分)。 然后细胞分别分化为神经元细胞和星形胶质细胞，分别对神经元细胞标志物Dcx (绿色) (图中B部分)、少突胶质细胞标志物GalC (红色) (图中C部分) 或者星形胶质细胞标志物GFAP (绿色) (图中D部分) 进行染色。 图中B到D部分的细胞核用DAPI (蓝色) 进行复染。