实现神经分化的简单方法
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“在这项研究中,我们报告了一种高效的无血清多能干细胞神经诱导培养基,其可在 7 天内将 hPSC 诱导为原始 NSC (pNSC),从而消除了耗时、费力的胚状体生成或挑取玫瑰花环的需要。”
——引用了 PSC 神经诱导培养基的出版物;Stem Cells Transl Med.2013 Dec;2(12):1022.
借助此简单方案,仅需 7 天时间即可启动对 PSC 神经干细胞的诱导。
可在左侧查看该方案,其中包括:
- 制备神经诱导完全培养基
- 分离出 PSC 并将其放入培养板中
- 向培养物中添加 PSC 神经诱导完全培养基
- 每隔一天更换一次培养基,直到细胞达到最大汇合度(第 6 天)
- 收获 NSC
图1.与现有方法不同,Gibco PSC 神经诱导培养基不需要胚状体 (EB) 形成的中间步骤,从而避免耗费时间、精力并减低变化性。
图2.80-90% 的神经诱导效率。
图3.使用 GibcoPSC 神经诱导培养基生成的神经干细胞 (NSC) 具有高表达的 NSC 标志物,并且可以进一步分化为其他神经细胞类型。
图4: NSC 分化基因表达谱 (A):NSC 相关基因的表达和样品群体的默认区域特征,由 R 软件生成的基因表达热图显示。来自多能干细胞 (PSC) 的 NSC 表达了大部分 NSC 相关基因,这些基因也由 fNSC 表达。原始 NSC 在默认情况下表达了与腹侧后脑相关的基因。基因表达数据经过 log2 转换。(B):选定非神经基因的表达以及样品群体的特征,由基因表达热图显示。由第 0 代 (P0) (pNSCp0) 的 PSC 分化而成的 NSC 以及扩增到 P6 (pNSCp6) 的 NSC、rdNSC 和人 fNSC 都包括在内以进行比较。基因表达数据被归一化(即所有基因的平均值为 0,SD 为 1)。缩写:fNSC,胚胎皮层来源的神经干细胞;NSC,神经干细胞;pNSCp0,在神经诱导培养基中分化第 7 天的 NSC;pNSCp6,传代六次的 pNSCp0;rdNSC,玫瑰花环衍生的神经干细胞。
通过三个简单步骤将多能干细胞分化为神经元:
- 使用 Essential 8 培养基进行 PSC 无饲养层培养
- 改用 PSC 神经诱导培养基,在 7 天内即可生成 NSC,消除了形成胚胎体 (EB) 的步骤
- 使用 B-27 和 N-2 补充剂将 NSC 分化为神经元、星形胶质细胞或少突胶质细胞
仅供科研使用,不可用于诊断目的。