Flp-In™系统使您可以稳定整合和表达感兴趣的基因,以提供单拷贝等基因细胞系。Flp-In™表达会在您选择的哺乳动物细胞系基因组中引入一个Flp重组靶标(FRT)位点。随后,包含您感兴趣的基因的表达载体会通过FRT位点的Flp重组酶介导DNA重组,整合入基因组。
我们为您提供一系列Flp-In™产品,包括表达载体和系统,以及包含稳定整合FRT位点的亲代细胞系。这些产品设计用于快速生成稳定细胞系,能够确保使用Flp-In™表达载体高水平表达您感兴趣的蛋白质。
FRT 位点
如上所述,Flp 重组酶介导的重组发生于特定 FRT 位点之间。FRT 位点最初从酿酒酵母中分离得到,用作 Flp 重组酶的结合位点且已经过充分表征(Gronostajski 和 Sadowski,1985;Jayaram,1985;Sauer,1994;Senecoff 等人,1985)。最小的 FRT 位点由一个 34 bp 序列组成,其中包含两个 13 bp 不完全反向重复序列,由包括一个 Xba I 限制性酶切位点的 8 bp 间隔区隔开(参见下图)。在大多数 FRT 位点发现了另外一个 13 bp 的重复序列,但不需要切割(Andrews 等人,1985)。虽然 Flp 重组酶与所有3个 13 bp 重复序列结合,但实际上在 8 bp 间隔区的边界处发生链切割(切割位点 [CS] 见下图)(Andrews 等人,1985;Senecoff 等人,1985)。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。