TVivid Colors™荧光蛋白载体是我们的下一代克隆和表达工具,其采用Aequoreavictoria来源的荧光蛋白(FP)对重组蛋白质进行简单无损的检测。搭配Gateway和TOPO克隆载体选项使用时,可让克隆、表达和观测变得前所未有地简单!
- Aequorea victoria水母来源的FP有着广泛、可信的公开记录,值得信赖
- 24小时内即可观测到荧光报告基因蛋白
- 使用多种色彩,可用于共显影应用
- 可轻松克隆到我们强大的Gateway和TOPO载体中
Vivid Colors™ 荧光蛋白的光谱属性
Vivid Colors™ EmGFP和YFP融合蛋白的表达,可通过使用标准FITC滤光片组的荧光显微镜或流式细胞仪检测到。为了最佳的可视性,推荐使用针对各种荧光蛋白激发和发射范围优化的滤光片组(参见下表)。
推荐滤光片 | ||||||
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蛋白质 | 颜色 | 激发峰 | 发射峰 | 突变 | Omega | Chroma |
EmGFP | 绿色 | 487 | 509 | S65T, S72A, N149K, M153T, I167T | XF100 | |
YFP | 黄色 | 514 | 527 | S65G, S72A, K79R, T203Y | XF1042 | 41028 |
CFP | 青色 | 452 | 505 | K26R, Y66W, N146I, M153T, V163A, N164H | XF114 | 31044 |
BFP | 蓝色 | 308-383 | 440-447 | F64L, Y66H, Y145F, V163A , N198S | XF10 | 31021 |
Cycle 3 GFP | 绿色 | 395478 | 507 | F64L, F100S, M154T, V164A | XF76 | |
Vivid Colors™ 荧光蛋白融合载体
此类Vivid Colors™载体用于在您的目的基因(GOI)的N端或C端融合荧光蛋白。我们为您提供Emerald Green(EmGFP)和黄色(YFP)荧光蛋白版本。您可以使用Gateway 或者TOPO克隆技术创建Vivid Colors™融合蛋白。Gateway Destination载体 需要使用入门克隆,而TOPO载体只需要您的GOI的PCR产物(TA Cloning)。无论您选择哪种克隆技术,Ultimate™ ORF Collection都能为创建融合蛋白提供全面而方便的全长cDNA克隆资源。
- 共表达您的蛋白质和Vivid Colors™荧光蛋白
使用一个单一载体,表达您的蛋白的天然蛋白质结构和EmGFP。Vivid Colors™ pcDNA™ 6.2/ EmGFP-Bsd / V5-DEST载体让您能够快速鉴别被转染的细胞,以观察您的基因所赋予的生物活动。您将需要使用您的基因的Gateway入门克隆形式,才能克隆进这个目的载体(DEST)。Ultimate ORF™ collection是服务于此的全面、方便的全长入门克隆资源。如果您已经拥有蛋白质的克隆产物,则可以用PCR扩增,并使用TOPO技术进行克隆,以制备入门克隆。 - • 使用其他Vivid Colors™荧光蛋白创建自己的载体
pRSET/CFP(青色)和pRSET/BFP(蓝色)载体包含来自Aequorea victoria的其他颜色版本的荧光蛋白质。这些蛋白质通常与YFP和EmGFP共同用于多色应用。除了用于细菌表达和荧光蛋白纯化,这些载体也可以亚克隆构建定制哺乳细胞表达载体。 - 慢病毒(Vivid Color™)emerald GFP对照表达载体
为了优化慢病毒包装和转导效率,并监测被感染细胞,您需要pLenti 6.2/EmGFP-GW表达对照载体。这种载体可为您生成高浓度慢病毒制备品,可以表达EmGFP以及用于杀稻瘟菌素筛选。详细了解哺乳动物表达载体的病毒递送。
如果需要使用其他启动子表达您的基因,或者使用其他选择标记来生成稳定细胞,可考虑使用pTracer™载体系列。这些载体可表达Cycle 3绿色荧光蛋白(Cycle 3 GFP),其激发和发射光谱与野生型GFP一致。虽然其几乎与Vivid Colors™ FP一样明亮,您需要使用合适的滤光片来观察到全面提高的亮度。
- pTracer™/Bsd 表达载体
选择CMV或者EF-1作为启动子,表达您的目的基因。pTracer™ EF载体表达您的蛋白质,并为其加上羟基端V-5和6xHis表位标记。pTracer™ CMV载体用于不加表位标记表达您的蛋白质。此类pTracer™ /Bsd载体表达作为Cycle 3 GFP融合产物的抗杀稻瘟菌素基因。 - pTracer™/Zeo 表达载体
选择SV40、CMV或者EF-1作为启动子,表达您的目的基因。pTracer™ EF载体表达您的蛋白质,并为其加上羟基端V-5和6xHis表位标记。pTracer™ SV40和CMV载体用于不加表位标记表达您的蛋白质。此类pTracer™ /Bsd载体表达作为Cycle 3 GFP融合产物的抗博来霉素基因。 - 启动子鉴定
如果您想鉴定一个未知启动子,则需要一个克隆和报告基因系统来监测PCR产生的突变的表达效率。pGlow和pBlue TOPO TA表达试剂盒为使用PCR产物进行TOPO克隆提供了便利,同时也能定量Cycle 3 GFP (pGlow)或b-半乳糖苷(pBlue)表达的启动子活动。 - GFP (cycle 3) TOPO TA 表达试剂盒
此类载体可用于克隆PCR扩增的目的基因,以生成N端或C端融合Cycle 3 GFP的融合蛋白。使用TOPO克隆,只需5分钟反应即可生成一个克隆。在验证融合蛋白方向后,即可用于表达。用以TOPO克隆载体的载体元件包括一个CMV启动子,用来高水平表达您感兴趣的基因和一个抗新霉素标记。
我们提供高特异性Aequorea victoria荧光蛋白抗体,包括多克隆抗GFP(兔血清)和抗GFP(兔IgG部分),可供蛋白印迹检测使用。这些抗体经过检测,表现出能与Vivid Colors™ EmGFP和YFP特异、强烈地反应。我们也提供很多不同的Molecular Probes抗GFP抗体偶联物,为您提供多种检测技术选择。
抗GFP;兔多克隆抗血清(A6455)
抗GFP;兔多克隆IgG片段(A11122)
抗GFP;ABfinity重组兔单克隆抗体(G10362)
感兴趣的基因 | 哺乳动物 | |||||
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描述 | 报告基因 | 实验形式 | 克隆方法 | 启动子 | 标记 | 选择 |
Vivid Colors™ pcDNA™ 6.2/C-EmGFP-DEST | Emerald GFP | C端FP融合 | Gateway | CMV | bsd | |
Vivid Colors™ pcDNA™ 6.2/N-EmGFP-DEST | Emerald GFP | N端FP融合 | Gateway | CMV | N端V5 | bsd |
Vivid Colors™ pcDNA™ 6.2/C-YFP-DEST | 黄色 | C端FP融合 | Gateway | CMV | bsd | |
Vivid Colors™ pcDNA™ 6.2/N-YFP-DEST | 黄色 | N端FP融合 | Gateway | CMV | N端V5 | bsd |
Vivid Colors™ pcDNA™ 6.2/ EmGFP-Bsd/V5-DEST | Emerald GFP | 原色 | Gateway | CMV | GFP-bsd融合< | |
Vivid Colors™ pcDNA™ 6.2/C-EmGFP-GW/TOPO 哺乳动物细胞表达载体 | Emerald GFP | C端FP融合 | TOPO | CMV | bsd | |
Vivid Colors™ pcDNA™ 6.2/N-EmGFP-GW/TOPO 哺乳动物细胞表达载体 | Emerald GFP | N端FP融合 | TOPO | CMV | N端V5 | bsd |
Vivid Colors™ pcDNA™ 6.2/C-YFP-GW/TOPO 哺乳动物细胞表达载体 | 黄色 | C端FP融合 | TOPO | CMV | bsd | |
Vivid Colors™ pcDNA™ 6.2/N-YFP-GW/TOPO 哺乳动物细胞表达载体 | 黄色 | N端FP融合 | TOPO | CMV | N端V5 | bsd |
NT-GFP 融合 TOPO TA 表达试剂盒 | Cycle 3 GFP | N端FP融合 | TOPO | CMV | G418 | |
CT-GFP 融合 TOPO TA 表达试剂盒 | Cycle 3 GFP | C端FP融合 | TOPO | CMV | G418 | |
pcDNA™ -DEST47 Gateway Vector | Cycle 3 GFP | C端FP融合 | Gateway | CMV | G418 | |
pcDNA™ -DEST53 Gateway 载体 | Cycle 3 GFP | N端FP融合 | Gateway | CMV | G418 | |
pBlue TOPO TA 表达试剂盒 | beta-gal | 不适用 | TOPO | 任意 | 不适用 | neo |
pGlow TOPO TA表达试剂盒 | Emerald GFP | 不适用 | TOPO | 任意 | 不适用 | neo |
pTracer-CMV/Bsd | Cycle 3 GFP | 天然 | R.E. | CMV | GFP-bsd融合 | |
pTracer-CMV/Bsd试剂盒 | Cycle 3 GFP | 天然 | R.E. | CMV | GFP-bsd融合 | |
pTracer-EF/Bsd A, B, & C | Cycle 3 GFP | 天然 + 标签 | R.E. | EF-1 alpha | C端V5, 6xHis | GFP-bsd融合 |
pTracer-EF/Bsd试剂盒 | Cycle 3 GFP | 天然 + 标签 | R.E. | EF-1 alpha | C端V5, 6xHis | GFP-bsd 融合 |
pTracer-CMV2 试剂盒 | Cycle 3 GFP | 天然 | R.E. | CMV | GFP-zeo融合 | |
pTracer-CMV2载体 | Cycle 3 GFP | 天然 | R.E. | CMV | GFP-zeo 融合 | |
pTracer-SV40试剂盒 | Cycle 3 GFP | 天然 | R.E. | SV40 | GFP-zeo融合 | |
pTracer-SV40 Vector | Cycle 3 GFP | 天然 | R.E. | SV40 | GFP-zeo融合 | |
pTracer-EF Kit | Cycle 3 GFP | 天然 + 标签 | R.E. | EF-1 alpha | C端V5, 6xHis | GFP-zeo 融合 |
pTracer-EF A, B, & C 载体 | Cycle 3 GFP | 天然 + 标签 | R.E. | EF-1 alpha | C端V5, 6xHis | GFP-zeo 融合 |
pRSET/CFP | Cyan | (不适用:细菌表达克隆) | 6xHis, Xpress™, EK | 不适用 | ||
pRSET/BFP | 蓝色 | (不适用:细菌表达克隆) | 6xHis, Xpress™, EK | 不适用 | ||
pLenti6.2-GW/EmGFP 表达对照载体 | Emerald GFP | (仅有GFP对照;无克隆位点) | CMV | 不适用 | bsd |
仅供科研使用,不可用于诊断目的。