实时荧光定量 PCR 的要素
概述实时荧光定量 PCR (qPCR) 检测、序列检测方法、TaqMan 和 SYBR 方法、定量分析以及绝对与相对定量法的基础知识。
不管您是实时荧光定量 PCR 或称为定量 PCR (qPCR) 的新手,还是想了解实时 PCR 的新应用,我们都有相关学习材料,包括视频和网络研讨会,帮助您理解这一技术并更快上手。
实时荧光定量 PCR 将 PCR 扩增和检测合并为单一步骤。这样就无需使用凝胶电泳进行产物检测,更重要的是这一方法是真正定量的。在实时荧光定量 PCR 中,荧光染料被用来在热循环中标记 PCR 产物。实时荧光定量 PCR 仪器在反应的对数期测定荧光信号的积累,获得快速精确的 PCR 产物定量以及客观的数据分析。
适合每个实时荧光定量 PCR 新手和想学习该技术基本原理的人的优质资源。 该版本为第 3 版,包括 6 章,共 70 页,涵盖了实验设计、数据分析、实时荧光定量 PCR 要领和故障排除等话题。
概述实时荧光定量 PCR (qPCR) 检测、序列检测方法、TaqMan 和 SYBR 方法、定量分析以及绝对与相对定量法的基础知识。
实时荧光定量 PCR,又称为 qPCR,可用于很多定性和定量应用,包括基因表达分析、用于鉴定癌症生物标记物的 microRNA 分析、单核苷酸多态性 (SNP) 基因分型、拷贝数变异 (CNV) 分析甚至蛋白质分析。 此查询 TaqMan 视频第17 集涵盖这些常见的实时荧光定量 PCR 应用。
UNG 或 UDG 可用于很多预混液。本文章介绍这两种酶及其如何用于 qPCR。
了解如何识别污染问题并避免或降低污染风险
选择逆转录法时,提问自己几个问题,我需要 1 步法还是 2 步法? 我是否想要从总 RNA 或 mRNA 开始? 最后,我想要使用什么类型的 RT 引物?
本文将重点强调设置和评估实时荧光定量 PCR (qPCR) 反应时必须考虑的因素。
使用数字 PCR 进行绝对定量时,无需已知的标准品。能够以数字 PCR 重复数确定的精确度对目标分子直接进行定量。 在相对定量中,您可以分析特定样品相对于参考样品(比如,未处理的对照样品)某个基因表达量的变化。
本节简要解释并说明了 TaqMan 检测方法如何作用于基因表达、基因分型、拷贝数变异、microRNA、突变检测和蛋白质定量等各种应用。
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您对 TaqMan 检测了解多少? 了解研究人员对该方法的常见错误观念。
创新工具和教育资源有助于推动从事实时荧光定量 PCR 的研究人员的工作。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。