特殊和自动化RNA分离支持 - 问题排查

• 沉淀miRNA：根据mirVANA™ miRNA Isolation试剂盒或mirVANA™ PARIS™试剂盒的说明进行操作。
• 两次酚/胍(离液试剂)提取：使用酚/胍盐裂解组织，然后用酚提取，离心，取上清，并沉淀RNA。
• 玻璃纤维过滤：使用离液剂裂解组织，将RNA结合在玻璃纤维膜上，然后洗涤除去未结合的DNA/蛋白/盐/核苷酸，然后洗脱RNA。

您需要在提取前将病毒从细胞中分离出来，以避免样品中细胞核酸的污染。

提取的RNA量本身就比较少，或者在乙醇沉淀过程中将RNA沉淀丢失，都可能导致RNA产量低。另外，不同组织的RNA含量不同，RNA的产量取决于样本的种类。

这一问题的出现可能有以下几个原因：

• 总RNA量过多：请检查你使用的总RNA的量（我们建议使用2至10 µg总RNA）。
• 磁珠或探针量使用不足：请使用推荐用量的探针或磁珠。
• 操作或干燥磁珠时没有正确操作：请根据推荐的操作指南对磁珠进行洗涤/混匀，不要让磁珠过度干燥。

在使用RiboMinus™试剂盒分离纯化RNA前，使用DNaseI消化总RNA样品，以除去基因组DNA的污染。

将软布或纸巾用温和的去垢剂、肥皂水或酒精润湿，然后擦拭磁力棒。

如果没有向磁棒套架插入磁棒套则程序不会开始运行。

如果起始材料过于粘稠，磁力棒将不能完全吸取磁珠。可以尝试稀释样本，并检查样本是否使用正确的方法进行匀浆及裂解。

这种情况有时会发生，但是这不会影响产量，因为样本已经从磁珠上被洗脱下来了。

一个可能的原因是塑料的磁棒套由于其本身的设计稍有弯曲。这也是为什么磁棒套是成对包装的，以保持它们的形状。您可以手动调整磁棒套主板的弯曲度，并再试一次。

关闭机器，然后检查仪器是否有可见的损伤。确保正在运行的实验程序使用的是正确的磁头。如果机器没有可见的损伤，请重新打开机器。这时，机器将会重置。如果问题又立即重新出现，则将机器关闭，并将磁头轻轻移到它移动路径的中央，然后再次重启机器。如果问题仍然出现，请拨打客服电话，联系重置磁力棒。

很不幸，磁珠被冷冻后，将失去结合RNA的能力，不能继续使用。

请按照下列建议步骤处理：

1. 按下键盘上的ESC键回到主屏幕。
2. 选择“1”进入手动屏幕。
3. 选择“2”将枪头归位到固定器中。仪器也会将所有轴线返回初始位置。
4. 关闭机器，取出程序卡并重新插入，重启机器，然后在没有试剂的情况下运行实验程序。
   
   如果同样的错误代码仍然出现，请尝试以下操作：
   
   关闭机器，取出程序卡并重新插入，重启机器，在手动菜单下，选择“2”，返还枪头。然后在没有试剂的情况下运行实验程序。

将软布或纸巾用温和的去垢剂、肥皂水或酒精润湿，然后擦拭磁力棒。

如果没有向磁棒套架插入磁棒套，则程序不会开始运行。

如果起始材料过于粘稠，那么磁力棒将不能完全吸取磁珠。可以尝试稀释样本，并检查样本是否使用正确的方法进行匀浆及裂解；向样本内加入少量去垢剂也可以提高磁珠的回收率；还可以对样品板进行快速离心，使磁珠沉积在板的底部，以提高磁珠的回收率。

这种情况有时会发生，但是这不会影响产量，因为样本已经从磁珠上被洗脱下来了。

不能，一旦实验程序停止，它将从头重新开始运行。您可以使用磁力架手动完成剩下的提取程序，或者从实验停止的步骤开始重新创建一个修改版的KingFisher™ Flex实验程序并运行该程序。