有关小鼠细胞因子、人细胞因子和非细胞因子蛋白的细胞内染色快速指南,见下文。
请查阅分步 胞内染色方案
小鼠细胞因子:流式细胞术胞内染色快速指南
小鼠细胞因子 | 细胞来源 | 活化 | 培养时间 | 重复刺激 | 细胞内团块 | 抗体 |
---|---|---|---|---|---|---|
GM-CSF | 小鼠脾脏 | ConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d) | 2d/3d | 抗 CD3(10ug/mL 固定化)+ 抗 CD28(2ug/mL 可溶)5hr | 布雷菲德菌素 A | MP1-22E9 |
IFN-γ | 小鼠脾脏 | ConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d) | 2d/3d | 抗 CD3(10ug/mL 固定化)+ 抗 CD28(2ug/mL 可溶)5hr | 布雷菲德菌素 A | XMG1.2 |
IL-1 α | 小鼠 PEC | mIFNγ (100ng/mL) (2hr)/LPS (100ng/mL)(22hr) | 2hr/22hr | - | 布雷菲德菌素 A | ALF-161 |
IL-1 β | 小鼠 PEC | LPS (100 ng/mL) (22hr) | 22hr | - | 莫能菌素 | NJTEN3 |
IL-2 | 小鼠脾脏 | ConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d) | 2d/3d | 抗 CD3(10ug/mL 固定化)+ 抗 CD28(2ug/mL 可溶)5hr | 布雷菲德菌素 A | JES6-5H4 |
IL-4 | 小鼠脾脏 | Th2 极化 | 6d | PMA (50 ng/mL) + 离子霉素 (1 ug/mL) 5hr | 布雷菲德菌素 A | BVD6-24G2、 11B11 |
IL-5 | 小鼠脾脏 CD4 | ConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d) | 2d/3d | 固定化) + 抗 CD28(2ug/mL 可溶)5hr | 布雷菲德菌素 A | TRFK5 |
IL-6 | 小鼠 PEC | LPS (100 ng/mL) (22hr) | 22hr | - | 莫能菌素 | MP5-20F3 |
IL-10 | 小鼠脾脏 | ConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d) | 2d/3d | 抗 CD3(10ug/mL 固定化)+ 抗 CD28(2ug/mL 可溶)5hr | 布雷菲德菌素 A | JES5-16E3、 JES5-2A5 |
IL-12/IL-23 (p40) | 小鼠 PEC | LPS (100 ng/mL) (22hr) | 22hr | - | 布雷菲德菌素 A | C17.8 |
IL-13 | 小鼠脾脏 | Th2 极化 | 6d | PMA (50 ng/mL) + 离子霉素 (1 ug/mL) 5hr | 布雷菲德菌素 A | eBio13A |
IL-17A | 小鼠脾脏 | Th17 极化 | 6d | PMA (50 ng/mL) + 离子霉素 (1 ug/mL) 5hr | 莫能菌素 | eBio17B7 |
IL-17F | 小鼠脾脏 | Th17 极化 | 6d | PMA (50 ng/mL) + 离子霉素 (1 ug/mL) 5hr | 莫能菌素 | eBio18F10 |
IL-21 | 小鼠脾脏 | Th17 极化 | 9d | PMA (50 ng/mL) + 离子霉素 (1 ug/mL) 5hr | 莫能菌素 | FFA21 |
IL-22 | 小鼠脾脏 | Th17 极化 | 12d | PMA (50 ng/mL) + 离子霉素 (1 ug/mL) 5hr | 布雷菲德菌素 A | IL22JOP |
IL-23 p19 | 小鼠骨髓 | mGM-CSF (40 ng/mL) | 8d | LPS (1 ug/mL) (24 hr) | 莫能菌素 | fc23cpg |
MCP-1/ CCL2 | 小鼠 PEC | LPS (100 ng/mL) (24hr) | 24hr | - | 布雷菲德菌素 A | 2H5 |
TNF α | 小鼠脾脏 | ConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d) | 2d/3d | 抗 CD3(10ug/mL 固定化)+ 抗 CD28(2ug/mL 可溶)5hr | 布雷菲德菌素 A | MP6-XT22、 TN3-19 |
注:小鼠 PEC=小鼠巯基乙酸盐诱出性腹膜巨噬细胞;ConA=伴刀豆球蛋白 A;Iono=离子霉素;LPS=脂多糖;PMA=佛波酯;2d=培养 2 天;5hr=培养 5 小时
人细胞因子:细胞内染色快速指南
人细胞因子 | 细胞来源 | 活化 | 培养时间 | 重复刺激 | 细胞内团块 | 抗体 |
---|---|---|---|---|---|---|
G-CSF | PBMC | LPS (1 ug/mL) | 24hr | - | 莫能菌素 | 8F5CSF |
GM-CSF | PBMC | PMA (30-50ng/mL)/Iono (1ug/mL) | 5hr | - | 莫能菌素 | BVD2-21C11 |
IFN γ | PBMC | PMA (30-50ng/mL)/Iono (1ug/mL) | 5hr | - | 布雷菲德菌素 A | 4S.B3 |
IL-1 α | PBMC | LPS (1 ug/mL) | 24hr | - | 莫能菌素 | 364/3B3-14、CRM8 |
IL-1 β | PBMC | LPS (100ng/mL) | 4hr | - | 布雷菲德菌素 A | CRM56 |
IL-1RA | PBMC | LPS (100ng/mL) | 24hr | - | 布雷菲德菌素 A | CRM17 |
IL-2 | PBMC | PMA (30-50ng/mL)/Iono (1ug/mL) | 4-6hr | - | 布雷菲德菌素 A | MQ1-17H12 |
IL-4 | PBMC | PMA (30-50ng/mL)/Iono (1ug/mL) | 4-6hr | - | 布雷菲德菌素 A | 8D4-8 |
IL-5 | CD4 | Th2 极化培养物 | 6d | PMA (50ng/mL) + 离子霉素 (1ug/mL) (5hr) | 布雷菲德菌素 A | TRFK5、JES1-5A10 |
IL-6 | PBMC | LPS (100ng/mL) | 24hr | - | 布雷菲德菌素 A | MQ2-13A5 |
IL-9 | CD4 | Th2 极化培养物 | 6d | PMA (50ng/mL) + 离子霉素 (1ug/mL) (5hr) | 莫能菌素 | MH9A4 |
IL-10 | CD4 | Th2 极化培养物 | 6d | PMA (50ng/ml) + 离子霉素 (1ug/ml) (5hr) | 莫能菌素 | JES3-9D7 |
IL-12/ IL-23 (p40) | PBMC | hIFN γ (100ng/mL) (2hr)/LPS (100ng/mL) (22hr) | 2hr/22hr | - | 布雷菲德菌素 A | C8.6 |
IL-13 | CD4 | 抗 CD3 (10ug/mL 固定化) + 抗 CD28(2ug/mL 可溶)+ IL-2 (10ng/mL) + IL-4 (20ng/mL) (2d);IL-2 (10ng/mL) + IL-4 (20ng/mL) (3d) | 2d/3d | PMA (5ng/ml) + 离子霉素 (500ng/ml) (4hr) | 布雷菲德菌素 A | PVM13-1 |
IL-17A | PBMC | Th17 极化培养物 | 6d | PMA (50ng/ml) + 离子霉素 (1ug/ml) (5hr) | 布雷菲德菌素 A | eBio64CAP17、 eBio64DEC17 |
IL-21 | PBMC | PMA (30-50ng/mL)/Iono (1ug/mL) | 4-7hr 或 12-18hr | - | 布雷菲德菌素 A | eBio3A3-N2 |
IL-22 | CD4 | Th17 极化培养物 | 6d | PMA (50ng/ml) + 离子霉素 (1ug/ml) (5hr) | 布雷菲德菌素 A | IL22JOP |
IL-23 p19 | PBMC | hGM-CSF (40ng/mL) +hIL-4 (40ng/mL) | 6d | LPS (1ug/mL) (24hr) | 莫能菌素 | 23dcdp |
MCP-1/ CCL2 | PBMC | LPS (1ug/mL) | 24hr | - | 莫能菌素 | 2H5、 5D3-F7 |
RANTES/ CCL5 | PBMC | LPS (1ug/mL) | 24hr | - | 莫能菌素 | VL1 |
TNF α | PBMC | PMA (30-50ng/mL)/Iono (1ug/mL) | 5hr | - | 布雷菲德菌素 A | MAb11 |
TNF β | PBMC | Th1 极化培养物 | 6d | PMA (50ng/mL) + 离子霉素 (1ug/mL) (5hr) | 莫能菌素 | 359-81-11 |
注:Iono=离子霉素;PMA=佛波酯;LPS=脂多糖;2d=培养 2 天;5hr=培养 5 小时;LPS 用于活化从 Sigma 获得的人 PBMC (#L-8274)
非细胞因子蛋白:细胞内染色快速指南
抗原 | 抗体 |
---|---|
小鼠/大鼠 Bcl-2 | 10C4 |
小鼠 CTLA-4 (CD152) | UC10-4B9 |
人 CTLA-4 (CD152) | 14D3 |
人/小鼠/大鼠细胞色素 C | 6H2 |
人 Foxp3 | PCH101 |
小鼠 Foxp3 | FJK-16s |
GATA3 | |
小鼠/人颗粒酶 B | eBioGrB |
小鼠 Langerin (CD207) | eBioRMUL.2 |
人 Nanog | hNanog.1 |
人 PCNA(增殖细胞核抗原) | PC10 |
小鼠穿孔素 | eBioOMAK-D |
人穿孔素 | dG9 |
ROR γ | |
小鼠 SLP-76 | MS76 |
人 SLP-76 | HS76 |
人/小鼠 T-bet | eBio4B10 (4B10、4-B10) |
人 TLR3 | TLR3.7 |
小鼠 TLR9 | M9.D6 |
人 TLR9 | eB72-1665 |
小鼠/人 ZAP-70 | 1E7.2 |
仅供科研使用,不可用于诊断目的。